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PCR 產(chǎn)物純化

時間:2023/4/21閱讀:1482
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材料與儀器

TE 或去離子水 PCR 產(chǎn)物
離心機和轉(zhuǎn)子 PCR 濾 件 微量離心管

步驟

一、材料

1. 緩沖液和溶液

TE(lOmmol/L Tris-HCl,lmmol/L EDTA,pH7.5) 或去離子水

2. 核酸和寡核苷酸

待測序的 PCR 產(chǎn)物

3. 離心機和轉(zhuǎn)子

帶有固定傾角轉(zhuǎn)子的小型離心機,如 Eppemlorf5415C

4. 特殊設備

AmiconMicrocon-PCR 濾件(Millipore) 或者相當?shù)漠a(chǎn)品,微董離心管或接收管

二、方法

1. 對每一個待純化的 PCR 產(chǎn)物,都在接收管中放置一個濾件,濾件的儲液面向上

儲液池中加入 400ul 去離子水或 TE,注意加樣時不要觸及膜。加入 100ulPCR 產(chǎn)物,避免帶進礦物油。如果 PCR 產(chǎn)物不足 100ul, 用去離子水或 TE 補足,蓋上蓋子。

2. 將 1 中所得組合體用帶有固定傾角轉(zhuǎn)子的離心機,l000 g 離心 15 min(例如,Eppendorf5415C 離心機上 3300r/min)。注意蓋子和管的結(jié)合部朝向轉(zhuǎn)子的中央。

3. 移去濾件,將其放入一干凈的收集管中,有膜面朝上(如果愿意,濾件可以一直

存到樣品分析結(jié)束)。在濾件上小心地加 20ul 去離子水或 TE,注意不要觸及膜,然后將濾件反轉(zhuǎn)過來,放回到干凈的收集管中,使帶有液體的一面朝下。

4.1000 g 離心 2 min, 收集純化的片段。


深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)??偛吭O在廣東,服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經(jīng)科學等領域的產(chǎn)品供應線,在各個領域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術支持與服務。


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