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Biozellen基質(zhì)膠在3D細胞球體培養(yǎng)實驗的應用操作

時間:2022/3/23閱讀:3153
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Biozellen®3D細胞培養(yǎng)基質(zhì)膠在3D細胞球體培養(yǎng)試驗步驟:

A、試劑制備

1、A 基質(zhì)膠:將 A 基質(zhì)膠溶于 37℃水浴槽回溫 10 分鐘, 確認*融解.

2、C 緩沖溶液(1X)制備:使用前將 10X C 緩沖溶液用冰的無細胞培養(yǎng)液(例如: 無血清 DMEM、opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .

3、D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.

B、Biozellen®3D細胞培養(yǎng)基質(zhì)膠的制備

全部步驟需要在無菌環(huán)境內(nèi)操作,操作步驟如下:

1、將 24 孔培養(yǎng)板放置于冰上預冷半小時。

2、細胞計數(shù)后取 2×10^5~2×10^7 細胞與 0.5 毫升 37℃ 細胞培養(yǎng)基均勻混合,并與 0.5 毫升 37℃ A 膠按照 1:1 等比例均勻混合,最終細胞密度1*10^5~1*10^7cells/mL。

:請選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)溶液與條件進行試驗。

3、取 20-40 微升步驟 2 的混合液滴于 步驟 1 預冷的培養(yǎng)板上,膠體將于 5 分鐘內(nèi)成膠。 注: 測試膠體是否成膠,可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。

4、待膠體成膠后,添加 1 毫升冰的 1X C 緩沖溶液,并蓋過步驟 3 的膠溶液,固定 15 分鐘。

5、待 15 分鐘固定后,小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養(yǎng)基溶液。

6、將含有細胞的膠于 37°C 二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)進行 7~14 天的培養(yǎng),并觀察細胞球體的形成,按正常培養(yǎng)基更換頻率進行更換操作。

C、溶膠與收集細胞球體準備程序

1、小心的將培養(yǎng)基吸取移除,并用 1X PBS 進行清洗。

2、小心的將 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的 D 緩沖溶液,蓋過膠滴于室溫反應 5 分鐘。

3、溫和的用 1 毫升移液管吸取,直到膠滴*溶解。

4、將含有細胞球體的溶液吸入 1.5 毫升離心管,用 1000 rpm 的轉(zhuǎn)速離心 10 分鐘,移除上清液體并收集細胞球體做分析。

D、收集單顆細胞準備程序

在分離單細胞前,先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作

1、添加 trypsin-EDTA 并與收集的細胞球體于 37°C 混合反應。

2、用 1 毫升移液管混合,直到細胞體*分解。

3、待細胞球體*分解,加入 3 倍體積的 1X PBS,并用 1000 轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速進行離心 10 分鐘,并移除上清液體收集沉淀的單細胞做分析。

Biozellen®3D細胞培養(yǎng)基質(zhì)膠編輯

Biozellen®3D 細胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝

貨號: B-P-00002-2、B-P-00002-4、B-P-00002-10

規(guī)格: 2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

保存條件:4℃保存、 保存兩年

一、產(chǎn)品描述

Biozellen®3D 細胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝包含整套基質(zhì)膠、膠體固定液、膠體溶解液,可應用到 3D 細胞培養(yǎng)與微環(huán)境應用等;本試劑盒操作便利且可調(diào)控基質(zhì)膠硬度進行多種細胞培養(yǎng)測試等;膠體可快速被固定液分解, 請操作前詳細閱讀此使用指南。

Biozellen®3D 細胞培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝為植物來源,無動物源成分、不含酚紅)

二、應用

•3D 細胞球體培養(yǎng)

•小鼠皮下成瘤

•細胞侵襲

•適合用于 3D 細胞藥物篩檢平臺

•細胞生長和分化

•代謝/毒理學研究

三、樣本類型

•腫瘤細胞系、哺乳動物組織

四、試劑盒組分

試劑盒組分編輯

 

 

深圳市安培生物科技有限公司是美國Biozellen公司的中國代理商。Biozellen®3D細胞/類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠現(xiàn)貨供應,經(jīng)驗證可*替代BD/康寧的基質(zhì)膠,來源為植物源且氨基酸序列人源化,無人畜共患病的病原菌或毒素污染,提供完整售后服務和技術支持。

安培生物科技有限公司Biozellen中國代理商)

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