大鼠原代乳腺上皮細胞的培養(yǎng)條件如下:
培養(yǎng)基成分:通常使用含胎牛血清(FBS)、生長添加劑、青霉素(Penicillin)和鏈霉素(Streptomycin)的專用培養(yǎng)基。這些成分能夠為細胞提供必要的營養(yǎng)和生長因子,同時防止細菌污染。
培養(yǎng)環(huán)境:
溫度:37℃。
氣體條件:95%空氣 + 5%二氧化碳(CO?)。這種氣體環(huán)境有助于維持培養(yǎng)基的pH值穩(wěn)定,促進細胞生長。
包被條件:為了增強細胞的貼壁性,培養(yǎng)器皿表面常需進行包被處理。常用的包被材料包括鼠尾膠原Ⅰ(濃度為2-5μg/cm²)、多聚賴氨酸(PLL,0.1mg/ml)或明膠(0.1%)。
換液頻率:建議每2-3天更換一次新鮮培養(yǎng)基,以提供充足的營養(yǎng)物質(zhì),并去除代謝廢物,維持細胞健康生長。
傳代比例與方法:
傳代比例:一般按1:2的比例進行傳代。
消化液:使用0.25%胰蛋白酶進行消化,使細胞從培養(yǎng)器皿表面脫離。
操作:消化后,需輕輕吹打細胞,使其成為單細胞懸液,然后進行離心、重懸,并接種到新的培養(yǎng)器皿中。
大鼠原代乳腺上皮細胞生長特性:
生長方式:貼壁生長。
細胞形態(tài):呈上皮細胞樣,多角形。
傳代代數(shù):由于是原代細胞,體外培養(yǎng)周期有限,一般可傳1-2代。
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