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DMEM培養(yǎng)基有哪些特點(diǎn)？
DMEM培養(yǎng)基(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，其特點(diǎn)可歸納如下：
一、營養(yǎng)均衡且濃度高
氨基酸含量豐富：DMEM培養(yǎng)基中的氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基(EMEM)的2倍，且含有非必需氨基酸(如甘氨酸)，為細(xì)胞提供充足的蛋白質(zhì)合成原料。
維生素含量高：維生素含量為EMEM的4倍，參與細(xì)胞代謝的多種關(guān)鍵途徑，如能量轉(zhuǎn)換、抗氧化反應(yīng)等。
碳水化合物與無機(jī)鹽：含有高濃度的葡萄糖(高糖型達(dá)4500mg/L，低糖型為1000mg/L)、無機(jī)鹽(如鈣、鎂、鐵離子)及微量元素，滿足細(xì)胞生長和代謝的多樣化需求。
二、pH值穩(wěn)定
緩沖系統(tǒng)：DMEM培養(yǎng)基使用碳酸氫鈉作為緩沖系統(tǒng)，配合5%的CO?氣體環(huán)境，可有效維持培養(yǎng)基的pH值在7.2至7.4之間，這一范圍對大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的生長至關(guān)重要。
丙酮酸與乳酸：部分配方中添加丙酮酸和乳酸作為輔助緩沖劑，進(jìn)一步增強(qiáng)pH穩(wěn)定性，適用于開放式培養(yǎng)系統(tǒng)(如培養(yǎng)皿)。
三、類型多樣，適用性廣
高糖型DMEM：
葡萄糖濃度高：提供更高能量代謝支持，促進(jìn)癌細(xì)胞、神經(jīng)元等高代謝需求細(xì)胞的貼壁與增殖。
適用場景：適用于生長較快、附著較困難的腫瘤細(xì)胞(如骨髓瘤細(xì)胞)、轉(zhuǎn)化細(xì)胞及高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。
低糖型DMEM：
葡萄糖濃度低：避免過量糖代謝壓力，降低乳酸積累，延長培養(yǎng)基更換周期。
適用場景：適用于原代成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等常規(guī)培養(yǎng)，以及需要控制糖代謝的實(shí)驗(yàn)。
特殊配方：
無丙酮酸鈉版本：適用于對丙酮酸敏感的細(xì)胞或?qū)嶒?yàn)。
無谷氨酰胺版本：滿足特定實(shí)驗(yàn)需求，如谷氨酰胺合成酶缺陷細(xì)胞的培養(yǎng)。
含HEPES版本：增強(qiáng)緩沖能力，減少CO?依賴，適用于密閉培養(yǎng)環(huán)境(如培養(yǎng)瓶)。
四、成分可調(diào)節(jié)，靈活性高
補(bǔ)充物添加：DMEM培養(yǎng)基本身缺乏蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和生長因子等必需成分，需通過添加胎牛血清(FBS)、生長因子、抗生素等補(bǔ)充物形成完整培養(yǎng)體系。常規(guī)培養(yǎng)通常需添加10%的FBS。
定制化配方：研究人員可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的DMEM配方，或調(diào)整補(bǔ)充物種類和濃度，以滿足特定細(xì)胞類型或?qū)嶒?yàn)條件的要求。
五、質(zhì)量穩(wěn)定，可靠性高
嚴(yán)格質(zhì)量控制：DMEM培養(yǎng)基經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制和優(yōu)化，確保成分穩(wěn)定、無菌、無內(nèi)毒素，為細(xì)胞培養(yǎng)提供可靠的基礎(chǔ)。
物理性質(zhì)穩(wěn)定：過濾除菌后呈淺黃色澄清液體，內(nèi)毒素含量≤1 EU/mL，滲透壓在295~340 mOsm/kg·H?O之間，符合細(xì)胞生長的理想條件。
六、應(yīng)用領(lǐng)域廣泛
基礎(chǔ)研究：支持原代細(xì)胞、干細(xì)胞、轉(zhuǎn)化細(xì)胞等多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，用于細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)等基礎(chǔ)研究。
生物醫(yī)藥生產(chǎn)：作為病毒宿主細(xì)胞(如Vero細(xì)胞)的擴(kuò)增基質(zhì)，用于疫苗生產(chǎn)；支持單克隆抗體、重組蛋白等生物藥物的生產(chǎn)。
藥物篩選與毒理學(xué)研究：評估化合物對細(xì)胞的影響，為藥物研發(fā)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
基因編輯與轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)：確保細(xì)胞在基因操作前后的良好生長狀態(tài)，提高實(shí)驗(yàn)成功率。