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實驗常見問題:bEnd.3細(xì)胞形態(tài)異常?從接種密度到代謝廢物排查步驟
通過感染表達(dá)多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體來轉(zhuǎn)化細(xì)胞。
別稱:bEND.3;b.End3;Bend.3;bEnd3;brain-derived Endothelial cells.3
種屬:小鼠
生長特性:貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
凍存條件:凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO
:溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn)):生長培養(yǎng)基:DMEM+10% FBS+1% P/S
:培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO?,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例:1:2-1:4
推薦換液頻率:2-3次/周
組織來源:大腦皮層
細(xì)胞類型:轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物安全等級:BSL-1
保藏機構(gòu):ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515 ECACC; 96091929
注意事項
1.該細(xì)胞在低密度下形態(tài)不規(guī)則,細(xì)胞數(shù)量少,鋪展面積大,高密度后形態(tài)會趨于一致,胞體密集。
2.細(xì)胞增殖偏慢,初次傳代建議1:2,細(xì)胞穩(wěn)定后建議傳代比例也不超過1:4。
3.注意觀察培養(yǎng)基顏色,顏色偏紫會導(dǎo)致細(xì)胞漂浮增加。
4.消化時間會隨著細(xì)胞生長時間和細(xì)胞密度而有所不同,需要結(jié)合消化時細(xì)胞狀態(tài)來判斷,消化到細(xì)胞可以滑落方可終止。
常見問題
Q1:bEnd.3細(xì)胞培養(yǎng)的時候有較多漂浮的細(xì)胞和碎片是否正常?
細(xì)胞生長過程中會有大約10%活細(xì)胞單顆漂浮,這部分細(xì)胞單獨培養(yǎng)不會貼壁,培養(yǎng)過程中不用特別處理,生長過程中會產(chǎn)生碎片。
Q2:bEnd.3細(xì)胞通常消化多久?
細(xì)胞培養(yǎng)時間越長越難消化,每次消化時間可能不固定,消化時以細(xì)胞鏡下狀態(tài)為準(zhǔn),細(xì)胞觸角收縮,細(xì)胞間隙明顯變大,輕拍培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以脫落時可終止消化,注意輕柔吹打細(xì)胞。
Q3:bEnd.3細(xì)胞形態(tài)有很多觸角是否正常?為什么低密度和高密度細(xì)胞形態(tài)不一樣?
這個細(xì)胞低密度呈現(xiàn)不規(guī)則細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞鋪展會比較大,高密度呈規(guī)則纖維狀形態(tài)會更規(guī)則。
引用文獻(xiàn)
Engineered Extracellular Vesicles Modified by Angiopep-2 Peptide Promote Targeted Repair of Spinal Cord Injury and Brain Inflammation(2025)
期刊:ACS Nano
DOI:10.1021/acsnano.4c14675
影響因子:15.8
引用產(chǎn)品: C8-D1A 細(xì)胞, bEnd.3 [BEND3] 細(xì)胞
Traditional Chinese Medicine Borneol-Based Polymeric Micelles Intracerebral Drug Delivery System for Precisely Pathogenesis-Adaptive Treatment of Ischemic Stroke(2025)
期刊:Advanced Science
DOI:10.1002/advs.202410889
影響因子:14.3
引用產(chǎn)品: BV2 細(xì)胞, bEnd.3 [BEND3] 細(xì)胞, SH-SY5Y [SHSY-5Y] 細(xì)胞