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PriCells: 免疫酶細胞化學技術中的雙PAP法檢測微量抗原

時間:2021-11-8 閱讀:269
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PriCells: 免疫酶細胞化學技術中的雙PAP法檢測微量抗原                                                      


在復合物體系中連接更多的PAP復合物,來進一步放大抗原,從而使靈敏度更為增強,適用于檢測微量抗原。

實驗方法:
1. 將固定后的標本用PBS漂洗;
2. 于室溫下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min,用來密封內(nèi)源性過氧化物酶;
3. PBS漂洗2次,每次3min;
4. 在室溫下用二抗的正常血清孵育20min;
5. 滴加一抗后在室溫下放置1h或4℃冰箱內(nèi)過夜;
6. PBS漂洗3次,每次3min;
7. 滴加二抗后于室溫放置30min;
8. 重復步驟6;
9. 加PAP復合物,室溫60min;
10. 重復步驟6;
11. 第二次滴加酶標二抗;
12. 用PBS液反復漂洗;
13. 第二次加PAP復合物;
14. 重復步驟12;
15. 將標本置于0.04%DAB+0.03%H2O2的溶液中顯色5~10min;
16. 用蘇木精復染后封片,鏡檢;

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