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什么是液相色譜以及它是如何工作的
閱讀：2676 發(fā)布時間：2022-1-13
液相色譜按其分離機理，可分為四種類型：吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法。
液相色譜是一種色譜技術(shù)，用于分離和分析溶液中混合物的化學(xué)成分，以確定是否存在或不存在特定成分，如果存在，則存在多少。高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是使用高色譜分辨率進行高效分離的高性能分析。分離的組分也可以在檢測后使用餾分收集器分離，作為純化的手段。HPLC有多種不同的配置，可用于分離分子量從半揮發(fā)性小分子到幾萬千道爾頓的大蛋白生物分子的溶解組分。液相色譜法是一種非常流行的分析技術(shù)，廣泛用于環(huán)境監(jiān)控，農(nóng)業(yè)，醫(yī)藥領(lǐng)域。
流動相通常是溶劑，借助高壓泵將樣品輸送并且通過系統(tǒng)。它在分離過程中也起著至關(guān)重要的作用?；旌衔镏袑α鲃酉嗑哂休^高親和力的組分將快速遷移通過色譜柱，而與固定相之間幾乎沒有相互作用。當組分的帶離開色譜柱或從色譜柱洗脫時，檢測器將給出與組分濃度成正比的響應(yīng)。進樣與檢測之間的時間稱為保留時間。對于一組給定的色譜條件，組分的保留時間將非常明確，可以與鑒定標準進行比較。
在反相色譜法中，極性較小的分析物會優(yōu)先分配到非極性固定相中，并且保留時間更長。數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)將檢測器響應(yīng)記錄為色譜圖中保留時間的函數(shù)。通常對色譜圖中記錄的峰進行積分以確定峰面積，該峰面積與樣品中存在的組分的濃度成正比。
自動進樣器將樣品注入流動相后，在色譜柱中進行分離過程。色譜系統(tǒng)的選擇性對色譜分辨率的影響最大，應(yīng)針對所研究的應(yīng)用和組件進行定制。選擇性可以通過改變流動相（不同溶劑）或固定相中存在的特定化學(xué)官能團（改變色譜柱類型）的電化學(xué)強度來改變。