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酶標(biāo)板與酶標(biāo)儀在植物酶活分析上的研究
閱讀：1074 發(fā)布時(shí)間：2021-10-12
酶標(biāo)板根據(jù)孔數(shù)，可分為96孔、48孔等，由于酶標(biāo)板主要是配合酶標(biāo)儀用，目前市面上的酶標(biāo)儀最多為96孔，因此酶標(biāo)板最為常用的也是96孔。在基于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的研究中，酶標(biāo)儀主要應(yīng)用于常規(guī)分子檢測(cè)（如核酸、蛋白濃度及酶活性分析等）；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究（如一些細(xì)胞信號(hào)事件如ROS，修飾的檢測(cè)）；整體細(xì)胞水平的分析（如細(xì)胞的活力、凋亡和殺傷等）。然而在植物領(lǐng)域中，酶標(biāo)儀的應(yīng)用則偏向前兩個(gè)方向，此外植物領(lǐng)域的酶標(biāo)板應(yīng)用普遍度也不及動(dòng)物，但這并不限制酶標(biāo)板在該領(lǐng)域的應(yīng)用前景。在此結(jié)合常見(jiàn)應(yīng)用案例分析酶標(biāo)儀酶標(biāo)板在植物領(lǐng)域中的應(yīng)用，提升它們的應(yīng)用價(jià)值。
在植物研究中，酶活分析也是常見(jiàn)的檢測(cè)之一，主要用于探究植物本身酶的功能和植物提取物對(duì)各種酶活性的影響?；诘孜锕ぷ鳈C(jī)制的不同，酶活可用光吸收法和熒光法檢測(cè)。例如通過(guò)多種植物的提取物對(duì)參與血糖調(diào)控的α-淀粉酶(α-amylase)和α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)活力的抑制。其中，α-淀粉酶的活力檢測(cè)是基于使用自身淬滅的DQ™starch熒光底物。隨著底物在酶的作用下發(fā)生降解，進(jìn)而發(fā)出熒光，并可通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化分析酶活。而α-葡萄糖苷酶活性的檢測(cè)則基于其底物光吸收屬性在酶處理下的變化。
通常，酶活檢測(cè)基于動(dòng)力學(xué)檢測(cè)模式，同時(shí)需要進(jìn)行控溫。多數(shù)酶標(biāo)儀酶標(biāo)板均可完成酶活檢測(cè)。此外，配備的專(zhuān)業(yè)分析軟件支持工作流，可進(jìn)行復(fù)雜的酶活設(shè)定和檢測(cè)，同時(shí)對(duì)動(dòng)力學(xué)的多種分析，如斜率、高速度、曲線(xiàn)下面積等，都可輕松用軟件批量分析。