離心管、PCR管、PCR板的相同點和區(qū)別

離心管、PCR管、PCR板的相同點和區(qū)別

1985年，美國Perkin-Elmer Cetus公司發(fā)明了具有劃時代意義的聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)，使人們夢寐以求的體外無限擴增核酸片段的愿望成為現(xiàn)實。PCR技術(shù)類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性—退火—延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。這個反應(yīng)過程在PCR反應(yīng)容器中進行。

      隨著基因擴增儀的不斷發(fā)展，其反應(yīng)容器也經(jīng)歷了從1.5ml到0.2ml（0.25ml）的離心管逐步發(fā)展成PCR專用的薄壁的0.2ml，0.1ml的PCR管。隨著pcr擴增反應(yīng)數(shù)量的提高，逐步形成了PCR條、PCR板高通量的基因擴增容器。

     PCR儀（基因擴增儀）其發(fā)展主要分為以下幾個階段。1、手動/機械手式水浴基因擴增儀；2、全自動風冷或半導(dǎo)體制冷的定性基因擴增儀；3、終點法半定量PCR儀；4、實時熒光定量PCR儀。

    1、手動/機械手式水浴基因擴增儀時期，主要用1.5ml的離心管作為反應(yīng)體系，此時的pcr試劑（反應(yīng)體系）有50-100ul，且需要加封石蠟油防止反應(yīng)體系揮發(fā)。且反應(yīng)管在水浴中需要一定的高度。

    2、全自動風冷或半導(dǎo)體制冷的定性基因擴增儀；在這個儀器時代，儀器相對較小，0.2ml的離心管被廣泛i應(yīng)用，由于儀器為半導(dǎo)體制冷或風冷，所以需要溫度的傳遞效率高，因此，專用的薄壁的0.2ml的pcr管應(yīng)運而生。如果此時的儀器沒有熱蓋裝置，則然需要加液體石蠟覆蓋反應(yīng)體系。

3、終點法半定量PCR儀器應(yīng)用時代，因為需要通過光度計檢測反應(yīng)結(jié)果，因此對PCR管的薄壁要求和光線通透性要求更高，pcr管的薄壁性是必要的條件。此時的pcr管主要是0.2ml的薄壁管。

4、實時熒光定量PCR儀儀器時代，此時普通PCR儀，梯度PCR儀，熒光定量PCR都有了熱蓋裝置，PCR反應(yīng)體系的效率也更高，反映體系基本在30ul以下，此時0.2mlPCR管和0.1mlPCR管被廣泛應(yīng)用，有的儀器采用毛細管作為PCR反應(yīng)容器。

    隨著PCR技術(shù)的廣泛應(yīng)用，96孔或者384孔的PCR反應(yīng)板是多個微量PCR管的集成，是專門為批量反應(yīng)設(shè)計的?？刹鸬腜CR板是由PCR條組成。

綜上所述：離心管按照其容量分好多種，常用的有1.5ml，2ml，5ml，15或者50ml，較小的1.5ml和2ml（250ul）在PCR技術(shù)應(yīng)用早期作為PCR管使用。隨著PCR技術(shù)的發(fā)展，微量離心管逐步被專用的薄壁、透明的0.2ml的專用PCR管替代，并逐步發(fā)展成0.2mlPCR管和0.1mlPCR管以及多孔的PCR板。

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