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凱氏定氮法原理
閱讀：1558 發(fā)布時間：2022-3-2蛋白質的測定方法，目前仍以1883年凱達爾氏(Kiedahl)發(fā)明的定氮法為基礎，它根據各種蛋白質都具有固定比數的氮這一事實，通過對氮的測定而推算出蛋白質含量，此法所得的含氮量除了確定屬于蛋白質組成成分的氮以外，還包括非蛋白質組成的其他有機及無機態(tài)氮，所以換算所得的蛋白質含量稱作為粗蛋白含量，一般蛋白質中的含量為18%，換算后即每6.25克蛋白質中含有1克氮，因此6.25成為換算系數K，但是不同的農產品及其制品的實際含氮量有區(qū)別，所以不同農產品必須采用不同的換算系數，如花生、大豆、蠶豆、大麥、小麥、燕麥、黑麥等含氮為17.6%，求得K=5.7，蕎麥、葵花籽、亞麻籽、籽、棉花籽、蓖麻籽等換算系數則為K=5.50，玉米、菜籽為6.00，水稻為5.95，上述以外的其他農產品的換算系數均適用6.25。盡管如此，目前世界上還沒有直接分離測定含蛋白質的可行方法。因此，迄今為止在國內外凱氏定氮法仍然是測定蛋白質含量的經典方法。所得結果準確、穩(wěn)定。
上海密通儀器生產的全自動定氮儀（蛋白質測定儀），是引進消化吸收國內外檢測新技術，結合我國國情，應用凱氏定氮法原理，采用化學與物理學相結合完成的成套蛋白質含量快速測定裝置。為糧食、食品、飼料、農業(yè)、商檢等檢測部門提供了理想的檢測設備。
注意事項
消化時如氣體外逸，加大自來水壓力。消化密封圈每次試驗結束清洗一遍延長使用壽命。堿泵每天工作完把NaOH溶液外接皮管移入蒸餾水瓶內，前面套好消化管抽洗幾次，防止堿濃度過高，殘留在堿泵內而影響壽命，也可防止單向閥閥芯粘連。待下次使用時，在蒸餾時須排出100mlNaOH，以防止一個樣品NaOH濃度不夠。
每次試樣蒸餾結束，必須迅速取下消化管，防止消化管液體倒吸至蒸發(fā)爐內腐蝕電熱管。冬天必須防止室內結冰損壞玻璃管。
側面加H2O 用水口的接口液體建議用桶裝飲用水的容器中每10升水中加入硫酸鉀8克左右增加導電性。如樣品管內液體突然增多，蒸發(fā)爐內水泡充滿瓶子時請排換掉蒸發(fā)爐內的液體再做。