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細胞破碎機的冷凍研磨技術講解

閱讀:618        發(fā)布時間:2020-12-12
   細胞破碎機即在樣品容器中放入研磨珠,利用容器的高速自轉和震動,帶動研磨珠劇烈運動,對樣品進行研磨粉碎,從而達到破碎細胞壁,或者將固體顆粒處理為粉末的目的。
  細胞破碎有關冷凍研磨技術的說明:
  細胞破碎分離提純某一種蛋白質時,首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來并保持原來的天然狀態(tài),不喪失活性。所以要采用適當的方法將組織和細胞破碎。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織,其細胞破碎的難易不一,使用的方法也不相同,如動物臟器的細胞膜較脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有較堅固的纖維素、半纖維素組成的細胞壁。幾乎所有細菌的細胞壁都是由肽聚糖組成,它是難溶性的聚糖鏈,借助短肽交聯(lián)而成的網狀結構,包圍在細胞周圍,使細胞具有一定的形狀和強度。破碎細菌的主要阻力是來自于肽聚糖的網狀結構,其網結構的致密程度和強度取決于聚糖鏈上所存在的肽鍵的數量和其交聯(lián)的程度。
  細胞放在低溫下冷凍(約-15℃℃),然后在室溫中融化,反覆多次而達到破壁作用。
  細胞破碎冷凍研磨的原理由于冷凍,一方面能使細胞膜的疏水鍵結構破裂,從而增加細胞的親水性能,另一方面胞內水結晶,形成冰晶粒,引起細胞膨脹而破裂。對于細胞壁較脆弱的菌體,可采用此法。

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