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無需高壓滅菌的瓊脂類培養(yǎng)基的配制方法有哪些?

閱讀:558          發(fā)布時(shí)間:2024-4-24
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目前培養(yǎng)基的主要滅菌方式有濕熱高壓滅菌、過濾除菌、加熱滅菌等。高壓滅菌為常用的滅菌方式,但也有部分培養(yǎng)基無需高壓滅菌,只需煮沸滅菌即可,如VRBA、VRBGA、VRBDA、XLD瓊脂、SS瓊脂、BS瓊脂、DHL瓊脂、HE瓊脂、XLT4、紫紅膽鹽瓊脂、四號(hào)瓊脂、慶大霉素瓊脂、沙門氏菌顯色、O157顯色等培養(yǎng)基等。針對(duì)此類培養(yǎng)基,特作出如下說明。

本公司的培養(yǎng)基標(biāo)簽用法中有時(shí)會(huì)寫“稱取本品Xg,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中……無需高壓滅菌"字樣,并未寫需要多少度滅菌多少分鐘,此時(shí)就需要注意不要用高壓滅菌鍋將培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,否則就不得不重新配制了。

正確的滅菌方式應(yīng)為:

1、水浴加熱溶解

使用玻璃容器即可。稱取適量干粉培養(yǎng)基加入蒸餾水中,置于沸水浴中,在水浴加熱的過程中時(shí)常攪拌或搖動(dòng)培養(yǎng)基使之受熱均勻,約25min~30min后可以看到培養(yǎng)基的內(nèi)部是澄清透亮的,無瓊脂粒的存在,此時(shí)就可以冷卻至所需溫度傾注平皿。

2、電磁爐加熱溶解

使用耐電磁爐加熱的容器(如搪瓷缸)。稱取適量干粉培養(yǎng)基加入蒸餾水中,將搪瓷缸放在電磁爐的中央,打開電磁爐開關(guān),開始加熱,用玻璃棒持續(xù)攪拌培養(yǎng)基以防底部焦糊,約1-2分鐘之后,培養(yǎng)基開始沸騰,產(chǎn)生了大量泡沫狀物質(zhì)并上涌,此時(shí)迅速將搪瓷缸拿開(以防飛濺出來),待泡沫消掉之后(約十幾秒鐘),再將搪瓷缸放上,沸騰起泡沫后再次拿開,如此反復(fù)使培養(yǎng)基沸騰4遍即可(如還有明顯瓊脂粒未溶解,可加沸一次),冷卻至所需溫度傾注平皿。

3、電爐加熱溶解

使用耐加熱的玻璃制品。此方法與方法2的過程一致,使培養(yǎng)基沸騰4遍即可。

注意事項(xiàng):

1、此方法僅限實(shí)驗(yàn)室配制培養(yǎng)基使用。

2、配制量不宜過多,建議配制量在500ml以下,配制的培養(yǎng)基體積建議在容器體積的60%以下。

3、操作時(shí)需做好防護(hù),如戴上棉手套,以防不小心燙傷。

4、使用電爐加熱時(shí)需注意防止玻璃容器受熱后碎裂。

5、工業(yè)化生產(chǎn)工藝需自行進(jìn)行摸索。

此方法的最終解釋權(quán)歸青島高科技工業(yè)園海博生物技術(shù)有限公司所有。

注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經(jīng)允許不得轉(zhuǎn)載。


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