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技術(shù)文章

常用大腸桿菌分離和計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的比較分析

閱讀:620          發(fā)布時(shí)間:2024-12-31

1.LB瓊脂:

  此培養(yǎng)基為非選擇性固體培養(yǎng)基,常用于分子生物學(xué)中大腸桿菌的培養(yǎng),也可用于大腸桿菌活化和純菌計(jì)數(shù)??稍谂囵B(yǎng)基用加入對(duì)應(yīng)的抗生素(如青霉素、四環(huán)素、卡那霉素等)進(jìn)行特定轉(zhuǎn)基因大腸桿菌的篩選。


2.伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB):

  此培養(yǎng)基為弱選擇性培養(yǎng)基,不僅適用于大腸桿菌的分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù),也適用于大腸菌群的分離培養(yǎng)。大腸桿菌由于強(qiáng)烈發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,菌落通常為紫黑色,帶有綠色金屬光澤(也有一些大腸桿菌菌落不帶金屬光澤),大腸菌群發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸稍弱,菌落通常為紅色或粉紅色,無金屬光澤,不發(fā)酵乳糖的其他腸道菌通常為無色或淡紅色菌落。因分離效果較弱,此培養(yǎng)基更常用于大腸桿菌或大腸菌群多管發(fā)酵法中陽性管的確認(rèn)。



3.麥康凱瓊脂:

  檢驗(yàn)分離腸道菌zui常用的培養(yǎng)基,在藥典中用于大腸桿菌的檢測(cè),在食品標(biāo)準(zhǔn)用于腸道致病菌的分離。培養(yǎng)基中較多的膽鹽及結(jié)晶紫對(duì)大多數(shù)革蘭氏陽性菌有很強(qiáng)的抑制效果,大腸桿菌由于強(qiáng)烈發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,在培養(yǎng)基上菌落為桃紅色,并且菌落周圍通常有明顯的沉淀環(huán),大腸菌群同樣能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸,菌落也為桃紅色,致病性的腸道菌則通常因不發(fā)酵乳糖(如志賀氏菌、沙門氏菌、變形桿菌等)菌落呈無色。此培養(yǎng)基由于對(duì)大腸桿菌的專一性較弱(大腸菌群和大腸桿菌的菌落特征比較接近),若樣品中大腸菌群的含量比較高,分離大腸桿菌的效果并不理想。



4.大腸桿菌顯色培養(yǎng)基/TBX培養(yǎng)基:

  利用酶底物法原理,對(duì)于大腸桿菌的分離和計(jì)數(shù)有高度的特異性,大腸桿菌特-有的β-葡萄糖醛酸苷酶可分解培養(yǎng)基中的底物,使菌落呈藍(lán)綠色,而大腸菌群和其他大多數(shù)雜菌通常為無色或其他顏色,革蘭氏陽性菌大多數(shù)不生長(zhǎng)。特別是在干擾菌較多的情況下,顯色培養(yǎng)基的分離率要遠(yuǎn)高于其他的培養(yǎng)基,缺點(diǎn)是價(jià)格較高,還有極少數(shù)大腸桿菌不產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸苷酶,不能顯色(如腸出血性大腸埃希氏菌O157菌)。此培養(yǎng)基適用范圍較廣,食品、水、環(huán)境等均可檢測(cè)。



5.哥倫比亞MUG培養(yǎng)基/MUG營(yíng)養(yǎng)瓊脂:

  原理與顯色培養(yǎng)基相同,大腸桿菌可利用β-葡萄糖醛酸苷酶特異性分解MUG,在紫外燈下產(chǎn)生熒光,特異性較強(qiáng),極少數(shù)不產(chǎn)生β-葡萄糖醛酸苷酶的大腸桿菌不產(chǎn)熒光。但此培養(yǎng)基沒有選擇性,多數(shù)雜菌都能生長(zhǎng),因此通常只用于含菌量較少的水中大腸桿菌計(jì)數(shù)。



6.VRBA-MUG培養(yǎng)基:

  在VRBA基礎(chǔ)上添加了MUG,相比較于哥倫比亞MUG培養(yǎng)基,VRBA-MUG培養(yǎng)基具有選擇性,可抑制革蘭氏陽性菌的生長(zhǎng),大腸桿菌和大腸菌群可在此培養(yǎng)基中生長(zhǎng)呈紫紅色菌落,周圍有沉淀環(huán),由于添加了MUG,在紫外燈下照射時(shí),大腸桿菌菌落可有熒光反應(yīng),而大腸菌群則沒有熒光。此培養(yǎng)基一般用于食品中大腸桿菌的檢驗(yàn)和計(jì)數(shù)。





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