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紫外分光光度計的基本原理和應(yīng)用
紫外分光光度計基本原理：
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團的信息，可以用標(biāo)準(zhǔn)光譜圖再結(jié)合其它手段進行定性分析。
朗伯-比爾定律：當(dāng)一束平行單色光通過含有吸光物質(zhì)的稀溶液時，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度乘積成正比，即A= kcl
式中比例常數(shù)k與吸光物質(zhì)的本性，入射光波長及溫度等因素有關(guān)。c為吸光物質(zhì)濃度，l為透光液層厚度。
紫外分光光度計應(yīng)用：
分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸、蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。我們實驗室主要是用來測物質(zhì)的光度以求得物質(zhì)的濃度或者酶活。