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非洲豬瘟快速診斷試劑盒如何使用
非洲豬瘟快速診斷試劑盒 【競道廠家發(fā)布】 Rapid diagnostic kit for African swine fever 型號：JD-ZWSJ
競道廠家為您提供符合國家要求的非洲豬瘟試劑盒，一下為操作步驟：
【操作步驟】
一、樣品制備
1、 血液樣品：抗凝血樣品置離心管中，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上層血漿;非抗凝血樣品置離心 管中，待凝固后，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上層血清，置于滅菌離心管中，編號待檢。
2、 組織樣品：采集脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨，加入1 mL生理鹽水混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心骨中，編號待檢。
3、 口腔液：進食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團吸引動物咀嚼，收集口腔液大于 500uL， 8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中，編號待檢。
4、 飼料：取適量研磨后的飼料(約0.2g)，放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP 管屮，振蕩混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中,編號待檢.
5、 灰塵：用無菌棉簽蘸取適量環(huán)境表面上的灰塵，放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP管中，振蕩混勻，8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中，編號待檢。
二、DNA的提取
1、取裂解液200uL加入無核酸酶1.5 mL離心曾屮，分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次，室溫放置5分鐘(如果室內(nèi)溫度較低時.需放置25°C水浴溫育)，再加入200uL無水乙醇，顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘處理，取上清液，以避免堵塞柱子;
2、 將液體轉(zhuǎn)入套有收集管的吸附柱中， 12000rpm離心1分鐘：
3、 棄收集管液體，向吸附柱中加600uL洗液I， 12000 rpm離心1分鐘;
4、 棄收集管液體，向吸附柱中加600uL洗液II， 12000 rpm離心I分鐘;
5、 棄收集管液體，12000 rpm離心2分鐘，以*去除殘留洗液;
6、將吸附柱轉(zhuǎn)入新的無核酸酸1.5mLEP管(長臂型)中，向柱中央滴加50 uL洗脫液，靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘，EP管中液體即為病毒DNA。
