細胞胞質(zhì)疏松，狀態(tài)不好，養(yǎng)不起來，怎么辦?

策略 1：一般情況下，從血清下手就行，要么換好血清，要么提高血清濃度，血清濃度提高到 15%～20% 培養(yǎng) 48 h，換成正常 10% 的濃度，用高濃度的血清培養(yǎng)時間過長對細胞有毒性。

策略 2：血清下手之后可以同時采取提高細胞密度的方法，從培養(yǎng)瓶換到六孔板，12 孔板等，細胞密度大，細胞分泌的細胞因子多，腫瘤細胞通過旁分泌途徑促進細胞生長。

預(yù)防策略：細胞胞質(zhì)疏松，老化的原因在于細胞傳代次數(shù)比較多，胰酶消化時間太長，這時候，一定要控制細胞傳代次數(shù)，注意胰酶消化時間，胰酶消化時間過長，容易導(dǎo)致細胞狀態(tài)不佳以及胞質(zhì)疏松。有一招，元元沒試過，可以嘗試，將細胞凍起來，過段時間復(fù)蘇，細胞會長得比較好。

長途運輸過來裝滿培養(yǎng)液的細胞如何處理?

很多人都會遇到從其他地方買來細胞或者快遞運來細胞，裝滿培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶的細胞怎么處理的問題。

第 1 步：先放 37℃ 培養(yǎng)箱放置 4 小時，這樣細胞在通過長途跋涉以后得以穩(wěn)定，觀察細胞狀態(tài)。

第 2 步：將新鮮培養(yǎng)基和舊的培養(yǎng)基 1:1 稀釋，如果細胞狀態(tài)不好，可以將血清濃度提到 15%，否則正常培養(yǎng)，這樣有一個過渡期，不至于細胞換血清之后狀態(tài)不佳，15% 的血清培養(yǎng) 48 h 之后換成正常濃度培養(yǎng)。

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一、血清類： 涉及到的血清品牌：SERANA、GIBCO、Hyclone、BI、Bovogen、Gemini、美國NTC、biowest、PAN、SIGMA、康寧、PAA……涉及到血清分類：南美源、北美源、澳洲源、超低Igg、透析型、活性炭處理、高脂、低脂型等，另外還有無外泌體血清、科研用人混合血清、AB血清、馬血清、小牛血清、驢血清、雞血清、兔血清、大鼠血清等

二、細胞類： 400多株細胞，含STR鑒定及確切來源證明

三、常規(guī)細胞培養(yǎng)試劑類： Hyclone、Gibco培養(yǎng)基（液體、干粉）、雙抗、胰酶、PBS緩沖液、HAKATA細胞凍存液

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