高效液相色譜是一個需要多個步驟的復(fù)雜過程，所有這些步驟都需要無縫地協(xié)同工作才能從樣品中獲得準(zhǔn)確且可重復(fù)的結(jié)果。分析實(shí)驗(yàn)室使用同一臺儀器設(shè)備在一定有限的時間內(nèi)處理大批量樣品和處理不同性質(zhì)的樣品，樣品類型或樣品制備方法和使用的材料之間的細(xì)微差別會影響最終的結(jié)果。想要確保過濾裝置中的材料與溶劑之間的相容性可以最大限度地減少問題，這就需要一致的過濾。選擇具有合適孔徑和截留特性的過濾裝置有助于確保有效去除微粒，而選擇合適尺寸和設(shè)計的過濾裝置有助于最大限度地減少樣品損失。良好的過濾還有助于保護(hù)色譜柱，并可能延長進(jìn)樣器和色譜柱的使用壽命。
一、為什么要為HPLC預(yù)過濾樣品：
處于對儀器性能和數(shù)據(jù)質(zhì)量的擔(dān)憂，通常使用的預(yù)防措施之一是將樣品預(yù)過濾，在將樣品加載到儀器之前對其進(jìn)行過濾，通常使用注射器過濾以確保它不含任何可能損壞進(jìn)樣器或弄臟進(jìn)樣器的顆粒物質(zhì)柱子。因?yàn)轭w粒污染會導(dǎo)致懸浮顆粒堵塞色譜柱篩板從而導(dǎo)致壓力增加和數(shù)據(jù)質(zhì)量下降，這一般可以直接通過更換色譜柱來解決。當(dāng)然，更換色譜柱需要考慮到成本和維護(hù)儀器時的停機(jī)時間。
二、過濾可保護(hù)泵：
從泵的角度來看，理想的溶劑絕對不含顆粒物質(zhì)的。顆粒會干擾止回閥球和閥座之間的密封界面使得其泄漏或失效，從而導(dǎo)致泵流量不一致或無流量。微粒還會加速泵活塞和密封件的磨損導(dǎo)致泄漏和流量不準(zhǔn)確。這些問題通常表現(xiàn)為嘈雜或不規(guī)則的基線、泵的操作壓力的意外波動以及保留時間的變化。
三、過濾可保護(hù)色譜柱：
在HPLC中通常使用的填充柱顆粒之間的間隙大小是顆粒本身直徑的一小部分，所以液相色譜分析柱的填充床本身也可以充當(dāng)有效的過濾器起過濾作用。色譜柱末端的篩板有兩個作用：它們將顆粒保留在色譜柱內(nèi)防止流動相攜帶的顆粒進(jìn)入并部分阻塞流經(jīng)顆粒床。顆粒在色譜柱入口側(cè)的玻璃料上的積聚也會導(dǎo)致玻璃料堵塞。
四、過濾可延長HPLC儀器組件的使用壽命：
考慮到盡管是極低水平的樣品污染也會給儀器帶來一些問題，所以在加載之前預(yù)過濾樣品是一個簡單、快速且成本低廉的步驟，可以大大改善HPLC的分析檢測結(jié)果。樣品預(yù)過濾延長了昂貴且對質(zhì)量至關(guān)重要的儀器組件（包括泵、進(jìn)樣器和色譜柱）的使用壽命。
過濾器的選擇是成功的關(guān)鍵。使用錯誤的濾膜可能會導(dǎo)致樣品污染或其他損壞，從而對結(jié)果產(chǎn)生負(fù)面影響。不同的流動相需要不同的過濾膜，以確保不需要的物質(zhì)不會從膜中浸出并進(jìn)入樣品中。不同的樣品還需要不同的膜，以確保分析物不會被膜束縛，并在進(jìn)樣前從樣品中去除或減少。
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