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ELISA試劑盒實驗中遇到顯色不全,花板怎么辦?

時間:2019/9/4閱讀:1739
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實驗過程中遇到的問題:

致使顯色不全、花板等成果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的因素及解決辦法總結(jié)于下

一、加樣
ELISA試劑盒也許因素:
 1)血清或血漿標(biāo)本別離欠好即進(jìn)行加樣; 2)手藝操作中,加樣板過多形成加樣后放入孵箱前等待時刻過長(特別是室內(nèi)溫度較高時) 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺起孔外。
解決辦法:
1 標(biāo)本為血清:將血液先天然寄存1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:有必要運用含抗凝劑的血液標(biāo)本搜集管,采血后有必要當(dāng)即倒置采血管混合5-10次,放置一段時刻后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢查,可放在2-8℃冰箱中,若要儲存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 4) 假如選用AT或別的全自動加樣,挑選FAME或別的后處理儀器加酶試劑。 5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
二、 孵育
也許因素:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*; 2) 孵育時刻人為延長,致使非特異性聯(lián)系緊附于反響孔周圍,難以清洗*。
解決辦法:
1) 貼封片或加蓋; 2) 按闡明過程嚴(yán)厲控制操作時刻。
 

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