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什么是蛋白質(zhì)印跡?

閱讀:1112      發(fā)布時(shí)間:2023-12-22
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蛋白質(zhì)印跡是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的常用技術(shù)。通常,蛋白質(zhì)樣品在 SDS 凝膠上進(jìn)行電泳,然后轉(zhuǎn)移到固相支持物(硝基纖維素或 PVDF 膜)上,以便隨后用特異性抗體進(jìn)行探測(cè)。與 RNA/DNA 印跡技術(shù)的進(jìn)步不同,剝離抗原/抗體并重復(fù)使用印跡是很困難的。


印跡的回收具有許多優(yōu)點(diǎn):

  • 有效利用數(shù)量有限的樣品。

  • 比較在同一印跡中使用不同抗體獲得的圖像。

  • 使用相同或不同的抗體確認(rèn)結(jié)果。

  • 重復(fù)使用印跡更加經(jīng)濟(jì)且耗時(shí)更少。

重復(fù)使用蛋白質(zhì)印跡的想法源于這樣的事實(shí):抗原-抗體復(fù)合物(例如,免疫親和柱)可以被破壞并且免疫親和柱可以多次重復(fù)使用。然而,免疫親和技術(shù)中常用的洗脫條件(低或高 pH、使用離液劑)并不能有效地從蛋白質(zhì)印跡中剝離抗體。

ADI 現(xiàn)在開(kāi)發(fā)了專(zhuān)門(mén)配制的解決方案,可以在溫和的條件下有效且?guī)缀醵康貏冸x抗體。它具有以下優(yōu)點(diǎn):新型抗體條解決方案的優(yōu)點(diǎn)

  1. 1. 室溫剝離抗體(無(wú)需加熱)。
  2. 2.無(wú)刺激性氣味,巰基乙醇。
  3. 3. Strip 溶液為 10X 溶液,可立即使用。只需將印跡浸泡在溶液中 10-15 分鐘即可。
  4. 4. 在封閉緩沖液(試劑盒中提供)中短暫孵育后,印跡可在 15-60 分鐘內(nèi)重復(fù)使用。




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