Duolink® PLA試劑
有關具體的產(chǎn)品建議，請參閱Duolink® PLA產(chǎn)品選擇指南。簡單來說，要運行用于熒光檢測的Duolink® PLP實驗，需要以下Duolink® PLA產(chǎn)品：
一、Duolink® PLA探針（一種PLUS和一種來自不同物種的MINUS，與您的一抗宿主物種相匹配）。每個試劑盒包括：
1.PLA探針（5x）— PLUS和/或MINUS，取決于產(chǎn)品；
2.封閉溶液 — 用于在孵育抗體前封閉樣品；
3.抗體稀釋劑 — 用于稀釋PLA探針，而且如果需要，用于稀釋一抗。
注意：將試劑盒的所有組分存放在4°C溫度下。
注意：如果需要，可用Duolink® PLA試劑盒生成定制的PLA探針。
二、Duolink®熒光檢測試劑（可選擇綠色、橙色、紅色等）
每個試劑盒包括：
1.連接原液（5x） – 稀釋以制備1x連接緩沖液
2.連接酶 (1 U/μL) – 添加以制備連接溶液
3.擴增原液 (5x) – 稀釋以制備1x擴增緩沖液
4.聚合酶 (10 U/μL) - 添加以制備擴增溶液
注意：將所有組分存放在-20°C溫度下。
三、熒光用洗滌緩沖液。
四、含DAPI的Duolin封固劑用于載玻片，儲存在2-8°C）或者細胞核染色劑和抗淬滅劑（用于微孔板，儲存在-20°C）
其他材料!
1.檢測目標蛋白質(zhì)的一抗。當與Duolink® PLA探針一起使用時，必須在小鼠、兔子或山羊中飼養(yǎng)。
2.高純度純水（無菌過濾，Milli-Q®或類似水質(zhì)）
3.載玻片上的樣品（細胞或組織），已經(jīng)過固定、恢復和透化方面的預處理。關于下列主題的相關建議和詳細信息，請參閱如何優(yōu)化Duolink®鄰近連接測定：
1.實驗設計和對照
2.選擇一抗和優(yōu)化
3.樣品處理
設備
1.熒光顯微鏡，帶有適當?shù)臑V光片、照相機和圖像采集軟件
2.37°C培養(yǎng)箱
3.水平搖床
4.加熱濕度箱或微孔板傳熱座
5.疏水筆，用于給反應區(qū)域劃界
6.冰塊（用于酶）
7.染色罐
8.鑷子
9.移液器和吸頭（1 μl至1000 μl）
10.與熒光顯微鏡兼容的蓋玻片
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