以下是關(guān)于大鼠肝微粒體混合功能氧化酶(MFO)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書的綜合信息整理：

　　BS-3491  大鼠肝微粒體混合功能氧化酶(MFO)ELISA試劑盒

　　一、試劑盒基本參數(shù)

　　檢測原理?：雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，在450nm波長下測定吸光度值?

　　規(guī)格?：48T/96T(可拆卸孔板)?

　　保存條件?：2-8℃冷藏，有效期6個月?

　　樣本類型?：血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清液等?

　　二、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

　　器材準(zhǔn)備?：

　　96孔酶標(biāo)儀、自動洗板機(jī)?

　　移液器及一次性槍頭(建議使用排槍)?

　　Eppendorf管及干凈塑料容器?

　　試劑處理?：

　　使用前將所有試劑平衡至室溫?

　　標(biāo)準(zhǔn)品需現(xiàn)配現(xiàn)用，稀釋后不可保存?

　　底物B需避光保存，避免金屬接觸?

　　三、實(shí)驗(yàn)步驟

　　加樣順序?：

　　按說明書要求依次加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本→生物素標(biāo)記抗體→HRP標(biāo)記親和素?

　　每步驟需嚴(yán)格控制溫育時間和溫度?

　　洗滌操作?：

　　使用20×洗滌液配制工作液，洗板后需充分拍干?

　　避免吸水紙直接接觸反應(yīng)孔?

　　顯色與終止?：

　　底物TMB顯色10-15分鐘，顯色后立即終止?

　　終止液為酸性溶液，需避免皮膚接觸?

　　四、注意事項(xiàng)

　　安全防護(hù)?：

　　操作時需穿戴實(shí)驗(yàn)服及手套，避免接觸終止液/底物?

　　禁止用嘴吸取任何試劑?

　　質(zhì)量控制?：

　　板內(nèi)變異系數(shù)<10%，板間變異系數(shù)<15%?

　　回收率需達(dá)到85%-115%?

　　五、數(shù)據(jù)計(jì)算

　　以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?

　　樣本濃度需高于空白對照OD均值+2SD才具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?

　　(注：完整說明書應(yīng)包含具體濃度梯度、溫育時間等參數(shù)，建議以實(shí)際試劑盒配套說明書為準(zhǔn)?)

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