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中級(jí)會(huì)員 | 第7年

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本生快訊:免疫印跡(Western blotting)檢測(cè)服務(wù)

時(shí)間:2023/5/22閱讀:1395
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  本生快訊:免疫印跡(Western blotting)檢測(cè)服務(wù)


  服務(wù)內(nèi)容:

  從動(dòng)物細(xì)胞、人或者動(dòng)物組織、細(xì)菌、植物樣品中提取蛋白樣品。

  對(duì)蛋白樣品進(jìn)行半定量分析

  western檢測(cè)

  電泳:聚丙烯酰氨凝膠電泳分離蛋白樣品

  轉(zhuǎn)膜:濕轉(zhuǎn)

  抗體孵育:使用抗體檢測(cè)膜上的特定蛋白

  信號(hào)收集:采用ECL發(fā)光法和chemidoc MP進(jìn)行信號(hào)收集分析

  樣品要求:

  細(xì)胞>1*107,組織>30mg,菌體濕重>10mg,植物>100mg

  說明 1) 要求做10孔膠,不足9個(gè)樣本算一張膜

  2) 要求做15孔膠,不足12個(gè)樣本算一張膜

  3) 以10孔膠為例: 7個(gè)樣品,1個(gè)蛋白抗體,算1張膜;9個(gè)樣品,1個(gè)蛋白抗體,算2張膜; 7個(gè)樣品,2個(gè)蛋白抗體,算2張膜;9個(gè)樣品,2個(gè)蛋白抗體,算4張膜。

  客戶提供:

  新鮮或者正確保存的樣品(按照我們的要求提供,參照下方注意事項(xiàng))

  灰度值分析(可選)

  服務(wù)說明

  提供的蛋白量與目的待檢測(cè)的蛋白數(shù)量有關(guān),蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加;

  胞漿蛋白和胞核蛋白樣品來源為:哺乳動(dòng)物細(xì)胞。

  每張膜樣品數(shù)量為1-8個(gè)(10孔膠)或者1-12個(gè)(15孔膠),不足一張膜的按一張膜收取;

  以10孔膠為例:

  7個(gè)樣品,1個(gè)蛋白抗體,算1張膜;9個(gè)樣品,1個(gè)蛋白抗體,算2張膜;

  7個(gè)樣品,2個(gè)蛋白抗體,算2張膜;9個(gè)樣品,2個(gè)蛋白抗體,算4張膜;

  如客戶有特殊上樣要求,按涉及的實(shí)際膜數(shù)量進(jìn)行計(jì)算。

  請(qǐng)客戶提供有質(zhì)量保證的一抗??贵w的使用量通過預(yù)實(shí)驗(yàn)后進(jìn)行確認(rèn),不回收利用一抗。

  建議提供蛋白的陽性對(duì)照品;

  免費(fèi)提供普通內(nèi)參:beta-actin,GAPDH,beta-tubulin;

  雙方簽訂合同后,收取70%的款項(xiàng)后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn);

  特殊要求請(qǐng)咨詢。

  注意事項(xiàng):

  對(duì)于細(xì)胞和一些微生物樣本,可去除培養(yǎng)基后,加裂解液制備蛋白樣品;若未能及時(shí)制備蛋白樣品,去除培養(yǎng)基后,將其液氮速凍后保存于-80℃(約一個(gè)月)或保存于液氮(約三個(gè)月);運(yùn)輸時(shí),樣本(含培養(yǎng)基)加冰袋,保持培養(yǎng)基低溫但不結(jié)冰,或者樣本去除培養(yǎng)基后加干冰。

  提取蛋白的樣本最好是新鮮的,同時(shí),以盡可能地提取有效蛋白為準(zhǔn)則;樣本需避免反復(fù)凍融。

  所有樣本均不建議保存于-20℃。-20℃時(shí),組織、細(xì)胞內(nèi)的水會(huì)結(jié)晶,細(xì)胞活性和組織微觀結(jié)構(gòu)會(huì)受到傷害,生物大分子受到組織、細(xì)胞內(nèi)多種因素的影響,穩(wěn)定性可能會(huì)明顯降低,但部分純化的大分子可以短中期保存。

  -80℃保存條件時(shí),樣本內(nèi)的生化反應(yīng)減弱,可中期保持組織細(xì)胞內(nèi)大分子的穩(wěn)定性,短期保持細(xì)胞活性和組織微觀結(jié)構(gòu);

  液氮保存可長期保持組織細(xì)胞內(nèi)大分子的穩(wěn)定性、細(xì)胞活性和組織微觀結(jié)構(gòu);液氮保存時(shí),盛裝樣本的Ep管管口需用封口膜密封,防止管口爆開造成交叉污染。

  抗體本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。


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