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通用型全基因組擴增試劑盒模板變性觀察
通用型全基因組擴增試劑盒(WGA)是用于基因組DNA擴增全基因組的試劑盒，可以方便、簡單、快速、經(jīng)濟的得到穩(wěn)定產(chǎn)量的基因組DNA擴增樣品。產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、 文庫構(gòu)建、單倍型分析、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異， 微衛(wèi)星差異，SNP，STR）等。操作簡便快捷，恒溫（30℃）反應(yīng)，無須PCR儀即可實現(xiàn)擴增。本產(chǎn)品只能用于科研。
模板變性：
1. 在PCR塑料管中加入9μL WGA溶液A，加入1μL純化好的基因組DNA模板 （DNA含量在10ng-100ng之間）。
2. 在PCR儀器上95℃3分鐘變性模板DNA。注意：必須打開熱蓋。
3. 冰上放置待用。
4. 加入10μL 2×WGA溶液B，輕柔吹打混勻。
5. 加入1μL phi 29 DNA聚合酶（10U/μL），輕柔吹打混合均勻。
6. 30℃保溫10-12小時。使用PCR儀進行30℃保溫并打開熱蓋保溫。如果采用30℃水浴，在樣品管中加入30-50μL石蠟油以防水分蒸發(fā)，因為30℃長時間的水浴也能使水分蒸發(fā)到管壁，從而改變反應(yīng)體系中各成分的濃度、降低WGA反應(yīng)效率。如果模板DNA量比較高，WGA三小時即可檢測到DNA擴增。
7. 65℃保溫20分鐘使phi29 DNA聚合酶滅活，然后-20℃長期放置或立即使用。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以強烈推薦反應(yīng)結(jié)束后65℃保溫20分鐘以將酶滅活以免其干擾后續(xù)反應(yīng)或長期保存時其降解DNA。