99超碰中文字幕在线观看-天天干天天日天天舔婷婷-我看操逼的好看的女人的-日本一二三四五区日韩精品

產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

您好 登錄 注冊(cè)

當(dāng)前位置:
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>技術(shù)文章>講解質(zhì)粒抽提步驟

技術(shù)文章

講解質(zhì)粒抽提步驟

閱讀:2928          發(fā)布時(shí)間:2021-9-2

質(zhì)粒抽提(Plasmid Extraction)方法即去除 RNA,將質(zhì)粒與細(xì)菌基因組 DNA分開,去除蛋白質(zhì)及其它雜質(zhì),以得到相對(duì)純凈的質(zhì)粒。提取質(zhì)粒DNA的方法有很多種,從提取產(chǎn)量上分可分為微量提取、中量提取、大量提取,從使用儀器上分可分為一般提取和試劑盒方法提取,從具體操作方法分可以分為堿裂解法、煮沸法、牙簽法等,各種不同的方法各有其優(yōu)缺點(diǎn),根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康目梢圆捎煤线m的提取方法。

3.png

Ⅰ.使用質(zhì)粒提取試劑盒提取質(zhì)粒時(shí)請(qǐng)參考具體試劑盒的操作說明。如Omega公司的E.Z.N.A.® Plasmid Mini Kit I, Q(capless) Spin (質(zhì)粒提取盒)。


Ⅱ.堿裂解手提法:此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取,提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、PCR擴(kuò)增、銀染序列分析。方法如下:

1、接1%含質(zhì)粒的大腸桿菌細(xì)胞于2mlLB培養(yǎng)基。

2、37℃振蕩培養(yǎng)過夜。

3、取1.5ml菌體于Ep管(離心管),以4000rpm離心3min,棄上清液。

4、加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/LEDTApH8.0,25mM/LTris-HClpH8.0)充分混合。

5、加入0.2ml溶液II(0.2mM/LNaOH,1%SDS),輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,置于冰浴5min.

6、加入0.15m1預(yù)冷溶液III(5mol/LKAc,pH4.8),輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,置于冰浴5min.

7、以10,000rpm離心20min,取上清液于另一新Ep管

8、加入等體積的異丙醇,混勻后靜置10min.

9、以10,000rpm離心20min,棄上清。

10、用70%乙醇0.5ml洗滌一次,抽干所有液體。

11、待沉淀干燥后,溶于50ulTE緩沖液中(或60℃溫育去離子水)



收藏該商鋪

請(qǐng) 登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~

對(duì)比框

產(chǎn)品對(duì)比 產(chǎn)品對(duì)比 聯(lián)系電話 二維碼 意見反饋 在線交流

掃一掃訪問手機(jī)商鋪
021-52961053
在線留言
阿瓦提县| 东海县| 秭归县| 阿鲁科尔沁旗| 吴江市| 子长县| 景东| 仁布县| 简阳市| 婺源县| 页游| 六枝特区| 光山县| 濉溪县| 尼玛县| 静安区| 泌阳县| 芒康县| 英超| 四川省| 建德市| 琼海市| 玉树县| 太和县| 长武县| 卢龙县| 永丰县| 南华县| 化州市| 泸州市| 丹巴县| 正阳县| 长垣县| 泌阳县| 肇州县| 辽阳市| 山东| 南木林县| 潜江市| 凌海市| 武陟县|