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目前，對于該腦區(qū)在主動回避學習中的調(diào)節(jié) 機制尚未*明確。目的：探索中腦導水管周圍灰質(zhì)氨基丁酸 (y-Aminobutyric acid，GABA)能神經(jīng)元在主動回避學習中的調(diào)控作用。 方法：通過穿梭箱實驗，對實驗小鼠進行主動回避訓練；通過早期即刻基 因c-fos免yi熒光染色確定小鼠PAG內(nèi)c-fos表達的變化；利用腦立體定位 注射，將攜帶有hM3Dq或hM4Di基因的重組腺相關(guān)病毒定位注射于 Vgat-cre轉(zhuǎn)基因小鼠的PAG內(nèi)，待2-3周后GABA能神經(jīng)元穩(wěn)定表達hM3Dq 或hM4Di。制備300|im厚度的PAG離體腦片，進行全細胞膜片鉗記錄， 記錄CNO對GABA能神經(jīng)元活動的調(diào)節(jié)。應(yīng)用化學遺傳學技術(shù)，在清醒 小鼠體內(nèi)特異性激活或者抑制PAG的GABA能神經(jīng)元，觀察改變GABA 能神經(jīng)元的活動對小鼠主動回避學習能力的影響；結(jié)果：Vgat-ChR2-EYFP 轉(zhuǎn)基因小鼠在主動回避學習中存在延遲建立的特性；主動回避學習中，與 正常小鼠相比，建立遲緩的小鼠PAG內(nèi)GABA能神經(jīng)元激活的數(shù)量增多；PAG內(nèi)表達hM3Dq的GABA能神經(jīng)元被其配體**氯氮平-N-氧化物 (Clozapine-N-oxide，CNO)特異性激活，動作電位發(fā)放頻率增加，表達 hM4Di的GABA能神經(jīng)元被CNO特異性抑制，神經(jīng)元動作電位的發(fā)放頻 率降低；在主動回避學習過程中，使用CNO特異性激活PAG的GABA能 神經(jīng)元可以延緩主動回避學習過程，使用CNO特異性抑制PAG的GABA

 

能神經(jīng)元并不影響主動回避行為的建立。結(jié)論：Vgat-ChR2-EYFP轉(zhuǎn)基因小 鼠存在主動回避學習障礙，PAG的GABA能神經(jīng)元調(diào)節(jié)主動回避行為的建 立，激活PAG的GABA能神經(jīng)元可以起到延緩主動回避行為建立的作用。