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中級(jí)會(huì)員 | 第8年

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PCR儀的實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)

時(shí)間：2023/2/20閱讀：1493
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PCR儀可應(yīng)用在多個(gè)領(lǐng)域，食品安全、水產(chǎn)養(yǎng)殖病害、寵物傳染病、植物病害、科研等，如食品工業(yè)鏈條中食品安全生物因素的檢測(cè)，對(duì)致病微生物檢測(cè)、轉(zhuǎn)基因原料鑒別、摻假摻雜鑒別等。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)：
1.戴一次性手套，若不小心濺上反應(yīng)液，立即更換手套；
2.使用一次性吸頭，嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用，吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中，避免氣溶膠的污染；
3.避免反應(yīng)液飛濺，打開(kāi)反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況，開(kāi)蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上，應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面；
4.操作多份樣品時(shí)，制備反應(yīng)混合液，先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好，然后分裝，這樣即可以減少操作，避免污染，又可以增加反應(yīng)的精確度；
5.最后加入反應(yīng)模板，加入后蓋緊反應(yīng)管；
6.操作時(shí)設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照，即可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性，又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性；
7.盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器，由于加樣器最容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染，最好使用可替換或高壓處理的加樣器。
如沒(méi)有這種特殊的加樣器，至少PCR操作過(guò)程中加樣器應(yīng)該專用，不能交叉使用，尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個(gè)區(qū)；
8.重復(fù)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證結(jié)果，慎下結(jié)論。

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