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重組蛋白純化的工藝創(chuàng)新方向：
1.連續(xù)流純化技術(shù)
原理：將傳統(tǒng)層析步驟整合為連續(xù)流動系統(tǒng)，減少操作時間和蛋白損失。
案例：
多柱層析串聯(lián)：親和層析→離子交換→疏水層析連續(xù)處理，避免中間樣品反復(fù)凍融。
微流控芯片層析：利用微流體技術(shù)實現(xiàn)快速、低樣品消耗的純化。
2.單克隆抗體（mAb）純化創(chuàng)新
ProteinA親和層析優(yōu)化：
開發(fā)耐堿性洗滌緩沖液（如pH12~13），減少洗脫雜質(zhì)。
采用納米抗體或人工支架抗體（如Fc融合蛋白）提高吸附效率。
多模式層析（Mixed-ModeChromatography）：
結(jié)合離子交換和疏水作用（如CAPTO珠），一步去除多種雜質(zhì)。
3.重組蛋白純化膜分離技術(shù)
切向流過濾（TFF）：
用于濃縮和換液，替代傳統(tǒng)超濾，減少蛋白聚集。
結(jié)合深層過濾（如除病毒過濾）去除病毒和微粒。
膜層析（MembraneChromatography）：
利用功能性膜材料（如離子交換膜）直接吸附雜質(zhì)，簡化操作。
4.新型標(biāo)簽與捕獲技術(shù)
自剪切標(biāo)簽：
如intein介導(dǎo)的自剪切標(biāo)簽（如CBD-intein），純化后無需蛋白酶切割。
非色譜依賴技術(shù)：
熱泳動（Thermophoresis）：利用溫度梯度分離蛋白與雜質(zhì)。
等電點沉淀：通過調(diào)節(jié)pH使雜質(zhì)沉淀，保留目標(biāo)蛋白。
5.人工智能驅(qū)動工藝優(yōu)化
數(shù)據(jù)驅(qū)動設(shè)計：
利用機器學(xué)習(xí)預(yù)測層析參數(shù)（如pH、鹽濃度）對雜質(zhì)去除的影響。
優(yōu)化緩沖液配方，減少離子強度或添加劑（如チャァ」剤）的使用。
在線監(jiān)測技術(shù)：
實時監(jiān)測紫外吸收（A280）、熒光或拉曼光譜，動態(tài)調(diào)整純化條件。
