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技術(shù)文章

使用高效液相色譜法測定動物性食 品中常山酮?dú)埩袅?/h3> 閱讀:706          發(fā)布時間:2021-4-13

前言:常山酮 (Halofuginone),為新型廣譜抗球蟲藥,對多種雞球蟲均有較強(qiáng)的抑殺作 用,被廣泛用于養(yǎng)雞業(yè)。隨著常山酮廣泛大量地使用,食品殘留和環(huán)境污染問 題也越來越突出。本方法參照食品國家標(biāo)準(zhǔn) GB 29693-2013,建立了動物性 食品中常山酮?dú)埩舴治龅母咝б合嗌V法。本方法適用于雞的肌肉和肝臟組織 中常山酮?dú)埩袅康臋z測。

 

常山酮分析 對試料進(jìn)行樣品前處理。稱取試料 4±0.04 g 于 50 mL 離心管中,加胰蛋白酶 50 mg,加水 2 mL(肝臟組織)或水 10 mL(肌肉組織),渦旋 1 min,用 10% 碳酸鈉溶液調(diào) pH 至 8.0,于 40 °C 水浴下酶解 3 h;取出,放至室溫,加 10% 碳 酸鈉溶液 2 mL,渦旋 1 min,加乙酸乙酯 20 mL,渦旋 1 min,在冰水浴中靜置 3 min,立即 5000 rpm 離心 2 min,將上清液轉(zhuǎn)入另一離心管中。下層液用乙酸乙 酯 20 mL 重復(fù)提取一次,合并兩次上清液(乙酸乙酯相)于同一離心管中。加 入 0.125 mol/L 乙酸銨溶液 10 mL,振搖 1 min,靜置 2 min。將上層乙酸乙酯相移 入另一離心管中, 再加 0.125 mol/L 乙酸銨溶液 10 mL,重復(fù)萃取一次,合并兩 次水相至同一離心管中,于 40 °C 氮吹,除盡殘余乙酸乙酯,備用。

 

 利用 Agilent Bond Elut Plexa 高級聚合物固相萃取小柱對備 用液進(jìn)行凈化,并使用配備了 Agilent Poroshell 120 EC-C18 色譜柱的安捷倫高效液相色譜系統(tǒng)對目標(biāo)物進(jìn)行快速分析,如 圖 1 所示為固相萃取操作流程,如表 1 所示為液相色譜分 析條件。

 

如圖 2-4 所示,本文所述高效液相色譜法適用于雞肉和雞肝 中常山酮?dú)埩舻臋z測,基質(zhì)對檢測結(jié)果無明顯干擾。通過 計算,得到此方法檢測限為 5 µg/kg、定量限為 12.5 µg/kg。 如圖 5 所示,雞肝中添加 125 µg/kg 常山酮的加標(biāo)試樣連 續(xù)進(jìn)樣 6 次考察其色譜系統(tǒng)重復(fù)性,常山酮峰面積 RSD 值 為 1.09%,表明儀器系統(tǒng)具有很好的穩(wěn)定性;本文所述方法 在 50-1000 µg/L 線性范圍內(nèi)常山酮的線性相關(guān)性良好,相 關(guān)系數(shù) R2 均大于 0.9999,如圖 6 所示;如表 2、3 所示,在 12.5-250 µg/kg 的添加水平下,雞肉和雞肝空白樣品中常山 酮的回收率為 72.0%-91.0%,RSD ≤ 7% (n = 6),表明該方法 的準(zhǔn)確度和精密度*能滿足喹諾酮類藥物多殘留分析的 要求。

 

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