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初級(jí)會(huì)員 | 第7年

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轉(zhuǎn)印儀使用簡(jiǎn)便,操作快捷,“1小時(shí)即可完成“

時(shí)間:2019/12/27閱讀:1325
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   轉(zhuǎn)印儀為從組織培養(yǎng)細(xì)胞制備純化完整RNA提供了一種快速而簡(jiǎn)便的技術(shù);1小時(shí)內(nèi)總RNA可通過(guò)兩塊96孔ScreenPlate得以提純;在純化過(guò)程中無(wú)需苯酚或乙醇沉淀,終RNA制備過(guò)程中無(wú)可檢測(cè)的DNA酶污染。
  轉(zhuǎn)印儀使用簡(jiǎn)便,操作快捷,1小時(shí)即可完成
  1、插上半干轉(zhuǎn)印儀的電源,打開儀器開關(guān),用雙手按住儀器兩段的上面的按鈕,手指向上抬,拿下半干轉(zhuǎn)印儀上面的陽(yáng)極電極板。
  2、Tris/甘氨酸-SDS-PAGE結(jié)束后,取出凝膠,在Tris/甘氨酸緩沖液中漂洗數(shù)秒。取凝膠方法:用刀片將兩玻璃板分開,將多余的凝膠劃去,上部以濃縮膠為準(zhǔn)全部棄去,下部以分子量標(biāo)準(zhǔn)小分子帶下一點(diǎn)全部劃去,取一10ml注射器注滿轉(zhuǎn)印緩沖液,插入玻璃板與凝膠之間注水,使水的壓力將兩者自然分開,邊推邊進(jìn),反復(fù)多次注水,直至凝膠從玻璃板上滑落下來(lái)。
  3、將NC膜和濾紙切出與凝膠一樣大小,置轉(zhuǎn)移緩沖液中濕潤(rùn)5-10min、
  4、按照以下順序放置濾紙,凝膠和NC膜到半干槽中。
  5、每層之間的氣泡要全部去除??梢杂?0ml吸管輕輕在上一層滾動(dòng)去除氣泡,然后用*緣的塑料片中間挖空與凝膠一樣大小或略小一點(diǎn),以防電流直接從沒有凝膠處通過(guò)造成短路,蓋好加上陽(yáng)極電極板。
  6、按下set鍵,設(shè)置轉(zhuǎn)印的時(shí)間及電壓,確定后儀器開始運(yùn)行。
  7、轉(zhuǎn)膜結(jié)束后,將膜取下封閉,關(guān)掉電源開關(guān),拔下電源,并清潔半干轉(zhuǎn)印儀。
  注意在操作過(guò)程中要按照電源線顏色將電泳儀插在電泳儀上,否則蛋白印跡不會(huì)被轉(zhuǎn)到NV膜或是PVDF膜上。

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