支原體污染會(huì)對(duì)細(xì)胞各個(gè)方面都造成不良影響，已經(jīng)成為細(xì)胞培養(yǎng)中高度重視的問題，因此，定期進(jìn)行支原體污染檢測(cè)是十分必要的。本支原體檢測(cè)試劑盒是采用PCR方法，特異性的檢測(cè)各種培養(yǎng)細(xì)胞生物材料（如細(xì)胞培養(yǎng)物、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分泌物、動(dòng)物血清等）中支原體的污染。試劑盒使用的混合引物是針對(duì)支原體16s rRNA序列的保守區(qū)域設(shè)計(jì)的特異性引物，可直接使用細(xì)胞培養(yǎng)液作為PCR模板，特異性擴(kuò)增支原體DNA，搭配配套的Mycoplasma PCR Mix（2×）一小時(shí)內(nèi)即可完成，本試劑盒檢測(cè)靈敏度高，可檢測(cè)低至20個(gè)拷貝的支原體。

4. 凝膠電泳：取10 μL PCR產(chǎn)物，使用1%瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測(cè)；

5. 結(jié)果分析：每次實(shí)驗(yàn)通過與陰性對(duì)照、陽性對(duì)照檢測(cè)結(jié)果比較確認(rèn)樣品支原體污染情況，陽性條帶大小500 bp左右。如陰性對(duì)照檢測(cè)結(jié)果中有條帶很有可能是P

CR體系中出現(xiàn)污染，建議重新實(shí)驗(yàn)確認(rèn)結(jié)果。如有必要，也可對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行常規(guī)測(cè)序，以確定具體的支原體種屬。