肽N-糖苷酶 F說明書

時(shí)間：2023/8/24閱讀：687

產(chǎn)品描述

PNGase F 是一種酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-連接糖，切割的糖型有：高甘露糖、雜合和復(fù)雜寡糖，切割位點(diǎn)為：最內(nèi)側(cè)的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之間。PNGase F 還提供不含甘油的形式，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。

本公司 PNGase 是重組表達(dá)，并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。

產(chǎn)品特點(diǎn)

? 糖蛋白的 N-連接糖的去糖基化

? PNGase F 幾乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-連接糖。

產(chǎn)品活性

活性定義

1 活性單位指在 37℃下， 1×PNGase 反應(yīng)緩沖體系下，60 min 內(nèi)將 10 µg 變性 RNase B 中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。糖基化RNase B分子量約 17,000 Da，去糖基后約13,683 Da。

活性測(cè)定條件

1× PNGase Buffer：糖蛋白變性緩沖液（含 0.1% SDS，10 mM DTT）、1×GlycoBuffer 2 緩沖液、1% NP-40，37℃反應(yīng) 1 小時(shí)。

糖蛋白于 1×糖蛋白變性緩沖液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分鐘使其變性。

產(chǎn)品組成

酶貯存緩沖液

20 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，5 mM EDTA，50% Glycerol，pH 7.5 @ 25°C

反應(yīng)緩沖液

10×PNGase Buffer：500 mM Sodium Phosphate (pH 7.5 @ 25°C)

其它緩沖液

10×糖蛋白變性緩沖液（Glycoprotein Denaturing Buffer）：5% SDS，400 mM DTT

10×NP-40：10% NP-40。

運(yùn)輸與保存

干冰運(yùn)輸，-20℃可保存 2 年，避免反復(fù)凍融

質(zhì)量控制

經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢測(cè)，確保該產(chǎn)品具有最高的活性和純度。

注意事項(xiàng)

1、已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反應(yīng)混合物中必須加入終濃度 1%的 NP-40。

2、要使天然糖蛋白去糖基化，建議增加酶量并延長溫育時(shí)間。

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