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盡管有些腫瘤或疾病確實(shí)是由于基因組本身遺傳信息改變所致,但是表觀調(diào)控有時(shí)能更好地闡述腫瘤或疾病發(fā)生的機(jī)制。在課題進(jìn)展中,尤其是在確定表型之后,我們往往從表觀調(diào)控,或轉(zhuǎn)錄調(diào)控,或蛋白修飾的方向去研究表型發(fā)生的機(jī)制。差異基因與表型間的關(guān)系往往是比較容易確定的,機(jī)制的挖掘則相對(duì)復(fù)雜!熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)(Luciferasereporter)是檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子與目的基因啟動(dòng)子區(qū)DNA相互作用的一種檢測(cè)方法。作為機(jī)制研究利器,如果我們想要研究某個(gè)轉(zhuǎn)錄因子是否能與某一靶啟動(dòng)子片段有作用。首先將靶基因啟動(dòng)子或其他待
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細(xì)胞培養(yǎng)避免支原體污染技巧&20分鐘快檢
自1956年研究人員細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)支原體污染以來(lái),支原體污染問(wèn)題無(wú)處不在。[1]綜合FDA、美國(guó)模式菌種收集中心(ATCC)等機(jī)構(gòu)收到的相關(guān)數(shù)據(jù),世界各國(guó)細(xì)胞系支原體污染的平均比例為30-60%。如何進(jìn)行安全的無(wú)支原體細(xì)胞培養(yǎng)?Lonza為大家總結(jié)了技巧一般來(lái)說(shuō),新的細(xì)胞株都需要做支原體檢測(cè),細(xì)胞培養(yǎng)期間,建議每1-2周進(jìn)行一次支原體檢測(cè)以防止污染。因此,在實(shí)驗(yàn)室的日常研究需求中,需要一種快速、全面的檢測(cè)方法以應(yīng)對(duì)日常的檢測(cè)需求。LonzaMycoAlert™——簡(jiǎn)便易行的支原體快檢LonzaM -
客戶分享 | Beacon®單B細(xì)胞篩選加速困難靶點(diǎn)抗體發(fā)現(xiàn)
在近期的網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)中,來(lái)自美國(guó)MImAbs的科學(xué)總監(jiān)Fran?oisRomagné博士討論了針對(duì)困難靶點(diǎn)的抗體發(fā)現(xiàn)策略。他們使用mRNA免疫和Beacon單B細(xì)胞抗體發(fā)現(xiàn)平臺(tái),加速獲得大量針對(duì)難以靶向的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)和離子通道的具有分子功能多樣性的抗體。從雜交瘤平臺(tái)到Beacon®單細(xì)胞抗體發(fā)現(xiàn)MImAbs是一個(gè)專注于發(fā)現(xiàn)和表征免疫治療抗體的研發(fā)平臺(tái)。MImAbs初期建立雜交瘤抗體平臺(tái),其平均篩選通量為2000-3000個(gè)克隆,從免疫小鼠到純化得到leads抗體的時(shí)間需要4.5個(gè)月到 -
逐典Trypelectase重組胰蛋白酶—無(wú)動(dòng)物源,集安全、高效、穩(wěn)定于一體!
日常實(shí)驗(yàn)中,在貼壁細(xì)胞傳代前需要把細(xì)胞用消化試劑從培養(yǎng)容器表面解離出來(lái),細(xì)胞得以分離成單個(gè)懸液傳代至含新鮮培養(yǎng)基的新容器內(nèi)。細(xì)胞消化的好,后續(xù)實(shí)驗(yàn)就會(huì)進(jìn)行的更加順利;反之,則既浪費(fèi)了時(shí)間又出不了成果。在細(xì)胞消化的方法中,酶消化法是常用的方法,使用合適的消化酶則是細(xì)胞消化的關(guān)鍵步驟。重組胰蛋白酶是一種使用基因工程技術(shù)生產(chǎn)的酶?,F(xiàn)代生物制藥的生產(chǎn)過(guò)程中,使用含有動(dòng)物源的原料,可能會(huì)將引起人畜共患病的潛在病毒源帶入產(chǎn)品中,如瘋牛病的BSE、口蹄疫病毒等,為了減少污染源,通過(guò)基因工程技術(shù)合成胰蛋白酶,解 -
白介素15(IL-15)的作用機(jī)制、生物學(xué)功能及應(yīng)用!
白細(xì)胞介素-15(interleukin-15,IL-15)是一種T細(xì)胞生長(zhǎng)因子,于1994年被兩個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn),與IL-2具有類似的生物學(xué)功能。IL-15主要由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。人體多種組織表達(dá)IL-15mRNA,如心、肺、腎、尤其是胎盤和肌肉。細(xì)胞來(lái)源和靶細(xì)胞分布較IL-2廣,故可能在不表達(dá)IL-2的部位發(fā)揮類似IL-2的效應(yīng)。IL-15的作用機(jī)制:IL-15Rα在人和小鼠中廣泛表達(dá),IL-15信號(hào)通路的主要機(jī)制是IL-15與細(xì)胞上的IL-15Rα亞基結(jié)合后,IL-15停留在細(xì)胞表 -
基因治療是指將外源正?;?qū)氚屑?xì)胞,以糾正或補(bǔ)償缺陷和異?;蛞鸬募膊。赃_(dá)到治療目的。基因治療的載體在基因治療過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用,一些病毒制劑和人工遞送技術(shù)已經(jīng)被用來(lái)嘗試安全地將蛋白受體或核酸載體遞送到宿主細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制,起到治療效果。然而,一些病毒載體的不良特性,包括它們的免疫原性,或它們引起的強(qiáng)烈副作用,已經(jīng)導(dǎo)致了嚴(yán)重的臨床不良事件,并限制了它們目前在臨床中的某些應(yīng)用。腺相關(guān)病毒(Adeno-associatedvirus,AAV)因具有低致病性、對(duì)宿主免疫原性弱、長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)、
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Revvity JANUS G3 BioTx 蛋白純化工作站,助力高通量蛋白樣品純化
從藥物篩選,成藥性分析,結(jié)構(gòu)優(yōu)化,藥理毒理研究直至細(xì)胞株構(gòu)建,上下游工藝開(kāi)發(fā)等環(huán)節(jié)——海量的蛋白樣品撲面而來(lái),做不完的純化實(shí)驗(yàn),長(zhǎng)夜漫漫等待下一個(gè)樣品純化,單個(gè)樣品動(dòng)輒3-4個(gè)小時(shí)的時(shí)間消耗……可謂是苦“蛋白純化實(shí)驗(yàn)”久矣。高通量蛋白純化工作站為加速生物治療分子的發(fā)展提供了機(jī)會(huì)。純化條件的小型化縮短了時(shí)間,允許樣品批量平行處理,提供了更高的統(tǒng)計(jì)顯著性和更大的變量寬度。JANUSG3BioTx蛋白純化工作站采用模塊化配置,同一平臺(tái)達(dá)成四種模式小規(guī)模蛋白純化的自動(dòng)化:PhyNexusPhyTips® -
在生物研究以及制藥過(guò)程中,樣本的存儲(chǔ)和運(yùn)輸是非常重要的一環(huán),正確的樣本運(yùn)輸可以保證樣本的完整性和可靠性,從而確保后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤。生物樣本運(yùn)輸過(guò)程中,樣本的存活和穩(wěn)定性與溫度密切相關(guān)。在運(yùn)輸過(guò)程中,應(yīng)盡量避免樣本的溫度波動(dòng),以免影響樣本的活性和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。【點(diǎn)擊放大查看】液氮(-196℃)是最牢靠的樣本保存辦法,可是由于樣本無(wú)法浸沒(méi)在液氮中,游離的碎片可能帶來(lái)交叉污染的潛在危險(xiǎn),因此液氮?dú)庀啵?150℃)環(huán)境是低溫存儲(chǔ)樣本的方法,可以很好地防止交叉污染的危險(xiǎn)。動(dòng)植物細(xì)胞及組織、海洋生