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一，什么是病毒
具有感染性，能夠?qū)е录膊〉奈⑿〉姆羌?xì)胞型生物。
各種形態(tài)和大小的病毒
雖然形態(tài)不一樣，但是大部分的病毒在分子水平上的組成上有一定的相似性
二，病毒顆粒的共有元件：
1. 由DNA或RNA組成的基因組（遺傳物質(zhì)）
2. 包裹著病毒基因組的蛋白質(zhì)衣殼（capsid）
3. 某些病毒具有脂質(zhì)包膜（envelope）
4. 介導(dǎo)進(jìn)入宿主細(xì)胞的蛋白
三，病毒的生命周期
病毒的侵入階段（virus entry）是開發(fā)抗病du藥物和疫苗的重要靶點(diǎn)
1. 粘附（Attachment）
2. 穿入（Penetration）
3. 脫衣殼（Uncoating）
4. 生物合成（Biosynthesis）
5. 組裝（Assembly）
6. 釋放（Release）
四，報(bào)告基因檢測(cè)已廣泛應(yīng)用于病毒研究中
應(yīng)用報(bào)告基因技術(shù)的好處：
• 可以消除或減少操作傳染性病毒的需要
• 可以在更低級(jí)別的生物安全實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行研究
• 可以加速高風(fēng)險(xiǎn)病毒的研究
五，借助假病毒顆粒和螢光素酶報(bào)告基因定量檢測(cè)病毒侵入
假病毒顆粒（ Pseudotyped Viral Particles，PVPs）
• 病毒衣殼蛋白或包膜蛋白包裹攜帶有報(bào)告基因的異源核酸
• 不具備復(fù)制形成病毒全部核酸序列的能力，僅有一輪感染能力
• 可更安全的用于中和抗體及抗病du藥物檢測(cè)
• 利用表達(dá)載體和包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)組裝形成
我們可以通過收集培養(yǎng)基上清，裂解細(xì)胞獲得假病毒顆粒，獲得假病毒顆粒后，用它來感染帶有相應(yīng)受體的細(xì)胞，72h后經(jīng)過粘附，穿入和脫衣殼，病毒攜帶的報(bào)告基因會(huì)在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，通過檢測(cè)報(bào)告基因的表達(dá)水平，就可以判斷病毒侵入的水平。 這里的報(bào)告基因是螢光素酶，螢光素酶更適用于定量檢測(cè)的報(bào)告基因。當(dāng)我們要研究中和抗體實(shí)驗(yàn)的時(shí)候可以在病毒最初的粘附階段進(jìn)行相應(yīng)的處理，檢測(cè)其對(duì)病毒侵入是否有抑制作用。
假病毒顆粒，其衣殼蛋白或包膜蛋白會(huì)包裹攜帶有報(bào)告基因的異源核酸，并且這種假病毒顆粒不具備復(fù)制形成病毒全部核酸序列的能力，僅有一輪感染能力。所以可以更安全的用于中和抗體及抗病du藥物檢測(cè)。
逐典螢光素酶報(bào)告基因
針對(duì)報(bào)告基因檢測(cè)不同的側(cè)重需求，逐典推出了3種檢測(cè)系統(tǒng)。
逐典螢光素酶報(bào)告基因特點(diǎn)：
1. 檢測(cè)靈敏度高，信號(hào)穩(wěn)定性好
HEK293-NFK B-LUC細(xì)胞加入梯度稀釋的TNF 在37C、5%CO條件下刺激6小時(shí)后,分別用增強(qiáng)型、超敏型、穩(wěn)定型檢測(cè)試劑進(jìn)行信號(hào)檢測(cè)。
2. 操作方便
僅需將底物和螢光素酶檢測(cè)緩沖液混合后直接加入到細(xì)胞即可。
3. 穩(wěn)定性好
同時(shí)在10次反復(fù)凍融實(shí)驗(yàn)中，逐典全系列報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒顯示出較強(qiáng)的穩(wěn)定性。
