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LabChip GXII Touch為生物治療藥物流程各個環(huán)節(jié)提供快速定量和樣品質(zhì)控。例如，自動化的表征檢測使用戶可以更快地獲得多個關鍵的質(zhì)量屬性。如今， 研究者們可在研發(fā)流程的更早期篩選出具備最佳指征的蛋白，并將“質(zhì)量源于設計"的理念整合到生物治療藥物開發(fā)流程中（圖 5）。

小規(guī)模高通量工藝開發(fā)

工藝參數(shù)

純化和樣品制備

JANUS BioTx Pro

工作站

關鍵質(zhì)量屬性的測定

信息學

工藝結果

圖 5. 利用 LabChip 微流體技術和 JANUS@Bio TX工作站， 您可以一天內(nèi)完成使用其他方法通常需要幾周才能完成的樣品純化和分析。探索更廣泛的實驗條件，節(jié)約您的生物治療藥物研發(fā)時間和成本（如上圖）。LabChip Touch 試劑可用千多種蛋白屬性分析，包括標準和皮克級的蛋白質(zhì)（圖 6）。

圖 6. 標準和皮克級靈敏度的蛋白質(zhì)檢測實驗

LaChip GXII Touch在 AAV衣殼蛋白分析中，提高了AAV純度分析的速度、通量和數(shù)據(jù)質(zhì)量。 AAV衣殼由三種病毒蛋白（VP1、VP2 和 VP3）組成,其比例、鑒別、純度影響藥物效能和效價強度，需要被鑒定并監(jiān)控以確保藥物質(zhì)量。利用 SDS存在下的微流控毛細管電泳技術分離 AAV衣殼蛋白，并測定每種病毒衣殼蛋白的大小和濃度。LabChip® GXII TouchTM 系統(tǒng)的ProteinEXactTM 試劑采用系統(tǒng)校準步驟，可實現(xiàn)高精度重現(xiàn)性，并具有更高的靈敏度和較寬的分析范圍。65秒內(nèi)即可完成樣品分析。這種高通量的分析方法可以同時測定 96份 AAV樣品，并提供傳統(tǒng)毛細管電泳可比結果（圖 7）。

圖 7. AAV8 變性后衣殼蛋白Labchip電泳圖祥品重現(xiàn)性好

AAV動力學觀察實驗的應用：LabChipTM GXII TouchTM 蛋白鑒定系統(tǒng)能夠在 30-50秒內(nèi)收集多達 300個實驗點，這可能為衣殼蛋白提供額外的信息。部分變性衣殼可由不同蛋白質(zhì)分子量（單體、二聚體、三聚體等）的混合物組成，如圖 8所示。在實驗期間。在1%SDS 和 TE緩沖液中加入 AAV樣品的 96孔板被加熱到特定的溫度進行變性，隨后進行檢測。

圖 8A和 8B：動力學實驗中部分變性的 AAV8 （圖 8B—只顯示二聚體）

LabChip® GXII TouchTM 蛋白分析系統(tǒng)平臺提供 AAV 衣殼蛋白的全面分析的能力。該方法為 AAV衣殼蛋白鑒定提供了一種決速、高通量、穩(wěn)定可靠的方法。高重現(xiàn)性和準確的衣殼成分檢測可以作為重組 AAV病毒顆粒表征的新方法,是基因治療應用的關鍵一步。

LabChip® GXII Touch 抗體表征應用

圖 9 展示了濃度為 1mg/mL的非還原MAb的電泳圖譜示例。左側(cè)插圖可見低含量片段,例如輕鏈、重鏈、重-輕鏈、重-重鏈、重-重-輕鏈和完整 MAb均實現(xiàn)良好分離。還原 MAb的電泳圖譜如圖 10所示，圖中可見非糖基化重鏈（NGHC）與重鏈之間具有足夠的分辨率，可進行準確定量。

圖 9. 非還原MAb電泳圖，顯示有片段和完整MAb的%純度。位于大約 17.5 秒處標記為 X 的峰是加入抗體中用作內(nèi)標物的溶菌酶。LM是內(nèi)標，Xsys是系峰。

圖 10. 還原 MAb 電泳圖譜

工作原理

LabChip電泳在小型微流體芯片上進行。分析之前， 將試劑裝載到芯片的各個孔中。這些孔與蝕刻有微小通道的石英片基相連， 每個微通道僅有人的發(fā)絲 粗細（圖 11）。

將芯片裝入 LabChip GXII Touch 系統(tǒng)后， 芯片孔與鉑 電極接觸， 由鉑電極提供電壓和電流控制。系統(tǒng)機 楲臂將微孔板上的樣品孔直接移動到芯片毛細管 “吸管"下方， 大約 150nL 樣品被抽吸到芯片上。 樣品染色和脫色由系統(tǒng)平臺自動完成。

待分析樣品逐一被電泳分離， 然后通過激光誘導的 熒光檢測樣品條帶。通過 ladder 和內(nèi)標確定各條帶 的大小和濃度。在各樣品分析之間清洗吸管， 從而 消除了交叉污染或殘留。

圖 11. 蛋白質(zhì)研究用的 LabChip