聯(lián)系電話
上?，|馳儀器有限公司
中級會員·6年
- 聯(lián)系人：
- 蘇小姐
- 電話：
- 400-820-3556
- 手機：
- 18521301252
- 地址：
- 上海市浦東新區(qū)環(huán)科路999弄浦東國際人才港13號樓2樓
- 網(wǎng)址：
- www.weichilab.com
掃一掃訪問手機商鋪
轉染5步驟：
第一步：獲取目標細胞
第二步：混合和結合
轉移至Lonza認證的電轉杯或電轉板條中
第三步：選擇Nucleofector程序，放入電轉耗材，按下開始按鈕
第四步：用培養(yǎng)基將電轉耗材的細胞轉移出來
第五步：轉移至培養(yǎng)M中。Nucleofectionmm電轉后3-8小時即可檢驗
提高核轉效率8個TIPS：
1.準備好加了新鮮培養(yǎng)基的多孔板，并在實驗前于37°C下預平衡
2.使用傳代次數(shù)少并具有推薦融合度或密度（對數(shù)生長）的細胞
3.限制胰蛋白酶暴露時間，仔細監(jiān)測細胞分離情況
4.根據(jù)優(yōu)化方案進行細胞計數(shù)并使用適量細胞數(shù)；所用細胞過少可能導致細胞死亡率增加
5.采用高質(zhì)量DNA，使用內(nèi)毒素去除試劑盒進行純化；請通過測定A260:A280比值檢查各質(zhì)粒制備液的純度
6.室溫下以離心速度80-100×g和方案規(guī)定的時間進行離心
7.離心后加入Nucleofector™溶液，混勻溶液/細胞沉淀制備成單細胞懸液，避免對細胞沉淀進行額外操作或用移液器槍頭抽吸
8.Nucleofection™核轉后，用核轉試劑盒內(nèi)配的一次性移液管在電轉耗材中的細胞頂部加入約500μL預熱培養(yǎng)基
