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隨著分子生物學(xué)和基因工程領(lǐng)域的不斷發(fā)展，細胞轉(zhuǎn)染技術(shù)的需求也越來越迫切。在當(dāng)前的研究中，常用的細胞轉(zhuǎn)染方法包括化學(xué)轉(zhuǎn)染法、電穿孔法、病毒載體轉(zhuǎn)染法等。然而，這些傳統(tǒng)的細胞轉(zhuǎn)染方法存在許多局限性，如低效率、不穩(wěn)定性、細胞毒性等問題。為了克服這些限制，現(xiàn)已出現(xiàn)了一種新型細胞轉(zhuǎn)染技術(shù)——4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。
4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)是由Lonza公司開發(fā)的一種基于脈沖電場技術(shù)的細胞轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，其主要特點是可實現(xiàn)對不同類型細胞的高效、精準轉(zhuǎn)染，并且無需使用病毒載體或熒光標記物。該系統(tǒng)通過電場脈沖引導(dǎo)外源DNA或RNA進入目標細胞，從而實現(xiàn)轉(zhuǎn)染。與傳統(tǒng)的電穿孔法相比，4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)具有更高的細胞存活率、更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細胞毒性，因此被廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、藥物篩選、細胞治療等領(lǐng)域。
在使用4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)時，首先需要選擇適合自己實驗樣品的Nucleocuvette®試管。隨后，將目標細胞接種在Nucleocuvette®試管中，并加入所需的外源DNA或RNA。接下來，設(shè)置適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)染程序，包括不同的脈沖電場強度、持續(xù)時間和間隔時間。最后，將Nucleocuvette®試管放置在相應(yīng)的設(shè)備中，進行電脈沖轉(zhuǎn)染。整個過程只需幾分鐘即可完成。
4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的優(yōu)點主要包括以下幾個方面：
1.高轉(zhuǎn)染效率：4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可以實現(xiàn)高達90%以上的細胞轉(zhuǎn)染效率，遠高于傳統(tǒng)的細胞轉(zhuǎn)染方法。
2.細胞存活率高：由于該系統(tǒng)對細胞的影響較小，因此轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較高，能夠保證后續(xù)實驗的穩(wěn)定性和有效性。
3.可控性強：4D-Nucleofector轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可以根據(jù)實驗需要對脈沖電場強度、持續(xù)時間和間隔時間進行精確控制，從而實現(xiàn)更加精準的轉(zhuǎn)染。
4.適用范圍廣：該系統(tǒng)適用于各種類型的細胞，包括哺乳動物細胞、植物細胞、昆蟲細胞等，具有較高的通用性。
