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如何提高細胞轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率

2022-8-2  閱讀(361)

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  細胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)可用于免疫細胞、干細胞、神經(jīng)細胞、內(nèi)皮細胞等較難轉(zhuǎn)染的原代細胞和各類細胞系中,其不依賴于病毒感染、不依賴于細胞有絲分裂,可加快基因表達,已成功轉(zhuǎn)染1200余種細胞系、130余種原代細胞,多數(shù)細胞系轉(zhuǎn)染效率可高達50-70%,部分原代細胞轉(zhuǎn)染效率可超過90%。目前,LONZA4D-Nucleofector已應用于CAR-T細胞的研究中。
  轉(zhuǎn)染效率高,在經(jīng)典的電穿孔技術上,配合高效率細胞轉(zhuǎn)染液,可實現(xiàn)無語倫比的細胞轉(zhuǎn)染效率,尤其是針對一些原代細胞、干細胞和難轉(zhuǎn)染的細胞系。可達99%,低在40%以上。
  為提高細胞核轉(zhuǎn)染效率,優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件不可少,相比其他品牌,LONZA可提供共享的數(shù)據(jù)庫,可檢索到700種以上的細胞轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)和操作手冊,除轉(zhuǎn)染操作指導外,還提供細胞來源、傳代、生長條件、培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)染后細胞培養(yǎng)基等各類技巧,大大節(jié)省摸索時間和試劑耗材損耗。
  細胞轉(zhuǎn)染做的好不好除了受轉(zhuǎn)染方法的影響外,還有很多別的影響因素,像細胞狀態(tài)和密度、培養(yǎng)基、載體大小等多方面因素都會影響到我們的轉(zhuǎn)染效率,所以細胞轉(zhuǎn)染是一個常見但是卻并不簡單的實驗,盡管如此,我們還是要努力追求理想的細胞轉(zhuǎn)染原則——轉(zhuǎn)染效率高、細胞毒性小、重復性好、安全、方法簡單、省時、經(jīng)濟。

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