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單克隆篩選的幾種方法介紹

閱讀:1994        發(fā)布時(shí)間:2020-10-26
  單克隆篩選是新一代細(xì)胞克隆篩選和挑取技術(shù),細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)能夠更少時(shí)間里,自動(dòng)化篩選并挑取更高水平表達(dá)的細(xì)胞克隆,擁有5組熒光通道,可以同時(shí)使用3組,細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)避免有限稀釋,快速高效篩選挑取雜交瘤克隆,建立穩(wěn)定細(xì)胞株,干細(xì)胞及特殊表面標(biāo)記細(xì)胞挑取及昆蟲細(xì)胞篩選挑取。
  單克隆篩選方法有有限稀釋法,半固體培養(yǎng)基挑選法,以及流式細(xì)胞術(shù)挑選法等。這其中有好多需要關(guān)注的點(diǎn),例如挑選細(xì)胞的參數(shù),挑選方法本身對(duì)細(xì)胞的損傷等。所以說,一個(gè)高效的篩選方法能讓工作效率提高好幾倍。
  有限稀釋法是目前常用的一種常規(guī)武器,這種方法篩選細(xì)胞的好處就是基本上不會(huì)傷害細(xì)胞。整個(gè)過程中細(xì)胞所經(jīng)歷的,也僅僅是在移液槍頭中的短暫停留,因此幾乎是零損傷。不過,這種方法的弊端也是顯而易見,就是效率問題。首先是鋪板效率,雖然不到一分鐘能將一塊96孔板鋪滿,但是一般來說96孔中有細(xì)胞的概率在2/3左右,其中單個(gè)細(xì)胞的概率就更小了,這些細(xì)胞要經(jīng)過一段時(shí)間的生長(zhǎng),抗體分泌之后,在其上清液中去檢測(cè)抗體含量,流程耗時(shí)太長(zhǎng),且效率低下,但是在沒有更先進(jìn)的設(shè)備的時(shí)候,這還是目前好的選擇。
  流式細(xì)胞分選儀是挑選細(xì)胞的不二法寶,在細(xì)胞分析分選當(dāng)中占有重要一席。在很多抗體研發(fā)企業(yè)中,也都有用到流式細(xì)胞儀來挑選高產(chǎn)細(xì)胞株,在這一應(yīng)用領(lǐng)域有其*優(yōu)勢(shì),分選快速(每秒上萬個(gè)細(xì)胞)。

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