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淺析單細(xì)胞分離的主要應(yīng)用和特點
閱讀：558 發(fā)布時間：2020-7-15
單細(xì)胞分離是一種從待分離的材料中直接分離單個細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得純培養(yǎng)的方法，該法在顯微鏡下操作，對于體積較大的微生物，可以用毛細(xì)管提取微生物個體；對較小的細(xì)胞或孢子，可以用顯微針、鉤、環(huán)等挑取以獲得單細(xì)胞；也可將適當(dāng)稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含有一個細(xì)胞的液滴培養(yǎng)。
單細(xì)胞分離快速高效接種單個活細(xì)胞至微孔板，主要功能為高效柔和地分離或分選活的單細(xì)胞，該系統(tǒng)通過微流控技術(shù)柔和地形成細(xì)胞液滴，同時利用白光和熒光成像實時分析細(xì)胞數(shù)量和熒光強度，將符合要求的單細(xì)胞液滴準(zhǔn)確接種至96孔板或384孔板等微孔板中。
整合分離過程中避免液體剪切力、電壓、超聲等影響，以維持高細(xì)胞存活率，減少對細(xì)胞的脅迫壓力，便于后續(xù)培養(yǎng)或分析，主要應(yīng)用包括細(xì)胞株開發(fā)、稀有細(xì)胞分離、單細(xì)胞基因組測序和單細(xì)胞RNA測序等。
高通量單細(xì)胞分離系統(tǒng)：白光系統(tǒng)，根據(jù)細(xì)胞直徑、圓度的形態(tài)指標(biāo)篩選特定細(xì)胞；白光+熒光系統(tǒng)，根據(jù)細(xì)胞直徑、圓度以及熒光強度篩選特定細(xì)胞。
主要特點：
1、分離效率>85%，單細(xì)胞活率>75%；
2、記錄分離前后的連續(xù)5張圖像，用于支持細(xì)胞株的單克隆性；
3、采用一次性分離槽，省卻系統(tǒng)的清洗驗證，交叉污染的風(fēng)險；
4、采用白光成像和熒光成像，可根據(jù)細(xì)胞直徑、圓度以及熒光強度篩選出感興趣的細(xì)胞；
5、內(nèi)置除靜電裝置，消除微孔板靜電，確保細(xì)胞液滴接種至微孔正中間，尤其是PCR板。