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單克隆分離深受廣大客戶的好評
閱讀：304 發(fā)布時間：2019-5-5
單克隆分離深受廣大客戶的好評
單克隆分離采用的是集流式細胞術和微流控技術于一體的新一代細胞分離技術。流式細胞儀的流體聚焦技術能夠極大地提高檢測靈敏度，另外微流控技術使得設備內(nèi)部的鞘液壓力可以降至2psi以下，也無需高頻振蕩，減少了分選過程對細胞的傷害，大大提高了分選出來的細胞的活性，適用脆弱細胞的分離。另外，一次性芯片真正實現(xiàn)了細胞分選過程中，樣本之間的*隔離（從加樣到分離全都在芯片中完成）。
“單克隆分離頭”利用聚丙稀導入頭細長柔韌無斷裂且導通的特性，將試劑、糊劑等材料直接送入細長多彎深孔處，有通過此分離頭將細胞分離，進行克隆培養(yǎng)。應用于醫(yī)療、環(huán)保、生化、測試等領域。
離子交換是溫和條件下分離蛋白質(zhì)混合物的一個有用的技術，常見的是應用增加鹽濃度的緩梯度溶液進行洗脫。pH梯度洗脫使用頻率較低（除專屬應用外，例如色譜聚焦），并且需要復雜的緩沖液體系。盡管如此，單克隆分離能夠利用常規(guī)緩沖鹽實現(xiàn)pH梯度洗脫，在分離單克隆抗體帶電異構體時的優(yōu)勢。
單克隆分離方法：
a、在培養(yǎng)皿中制備飼養(yǎng)細胞（小鼠腹腔細胞）單層。
b、臨用前將2.0%瓊脂糖生理鹽水溶液與等量雙倍濃度的HT培養(yǎng)液混勻，配成1%瓊脂糖培養(yǎng)液，45℃水浴中溫育。
c、吸去平皿上層培養(yǎng)液，加入1%瓊脂糖培養(yǎng)液3ml，室溫10分鐘。
d、取雜交瘤細胞懸液1ml，加入1%瓊脂糖培養(yǎng)液1ml混勻，鋪于上層。
e、37℃、7.5%濕潤培養(yǎng)7-14天；克隆生長至2mm時，用毛細吸管吸出克隆，直接轉(zhuǎn)種于含有飼養(yǎng)細胞的24孔板，擴大培養(yǎng)。
f、吸取上清，檢測抗體，陽性孔可繼續(xù)克隆化，或擴大培養(yǎng)、凍存。