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NH2-Cy5.5蛋白表面賴氨酸側(cè)鏈官能團2097714-44-6

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Cy5.5 (Cyanine 5.5) 是一種發(fā)近紅外(NIR)熒光的花青素?zé)晒馊玖稀K南庀禂?shù)高,熒光也很亮,并且對pH不敏感,并且由于它的熒光波長(Em:~700nm)恰好處于肌體組織近紅外窗口 I 的區(qū)域(肌體的血液,體液和組織此區(qū)域背景熒光弱,而長波長穿透性強),所以Cy5.5常應(yīng)用于小動物活體體內(nèi)成像中。 Cy5.5可以用來標(biāo)記蛋白,抗體,多肽,納米粒等,它***常見的使用是標(biāo)記核酸分子(DNA和RNA)。

伯胺基(primary amine)是生物標(biāo)記反應(yīng)中常用的基團。蛋白表面賴氨酸側(cè)鏈(residue)官能團就是伯氨基,伯胺基可以和NHS活化酯(N-羥基琥珀酰亞胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester),異氰酸酯(isothiocyanate, ITC)或其它活化基團反應(yīng)生成穩(wěn)定鏈接,從而把Cy5.5分子連接到目標(biāo)分子上。

Cy5.5-伯胺的水溶性較低,所以在水相的標(biāo)記反應(yīng)體系內(nèi)需要使用有機共溶劑,常用有機溶劑包括DMF,DMSO和乙腈等。如需標(biāo)記的分子對有機溶劑敏感,可選擇磺化花青素(sulfonated cyanine),即磺化-Cy5.5-伯胺。兩者的光譜性質(zhì)幾乎一致,因此大部分應(yīng)用可相互替換。兩者的主要區(qū)別在于:磺化染料是水溶性的,在水相的標(biāo)記反應(yīng)體系內(nèi)不需要使用有機共溶劑,并且降低染料在水中聚集的可能性,增強標(biāo)記效率。

Cy5.5-伯胺標(biāo)記后的產(chǎn)物Ex/Em是680/698nm。和它具有相似熒光特性的染料包括Alexa Fluor 680,DyLight 680等。

英文名:NH2-Cy5.5

Cy5.5-amine

Cyanine5.5 amine 

中文名:花青素CY5.5氨基

CAS號:2097714-44-6 (without anion),2097714-45-7 (chloride)

分子式:C46H58Cl2N4O

分子量:753.88

結(jié)構(gòu)式:


ex/em:680/698 nm (PBS緩沖液)

消光系數(shù)(ε):209000 L?mol?1?cm?1

***產(chǎn)率(Φ):0.2

外觀:深藍(lán)色固體

溶解性:可溶于氯仿,甲醇,乙腈,DMF等有機溶劑,難溶于水

保存條件:避光,干燥,-20℃保存

運輸條件:低溫運輸

簡介:氰基5.5(Cy5.5氨基)胺衍生物。該染料含有一個游離胺基,可以與多種功能結(jié)合,包括NHS酯和環(huán)氧化合物。氰基5.5是一種遠(yuǎn)紅色染料,適用于活體成像和需要低熒光背景的應(yīng)用。

注意事項:

1)Cy5.5-伯胺水溶性較低,標(biāo)記反應(yīng)可在有機溶劑中進行或者含有機助溶劑的水相中進行。

2)標(biāo)記時使用不含氨基的緩沖體系,比如磷酸鈉緩沖液(PBS),Hepes緩沖液,碳酸氫鈉緩沖液;或硼酸緩沖液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的緩沖液,比如Tris,甘氨酸等,它們會和Cy5.5上的伯胺競爭。高濃度咪唑(imidazole)也會影響反應(yīng)。

3)標(biāo)記反應(yīng)不要放在強光下,因為大部分熒光化合物在強光下長時間照射會緩慢光漂泊(photobleaching)。

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Cy7.5 alkyne 

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