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上海吉至生化科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ （125mg）,IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進(jìn)口 100g |
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2023-7-24 閱讀(251)
無(wú)菌條件下取新生一天的SD大鼠背根神經(jīng)節(jié)。
鏡下去除神經(jīng)根和外膜，放入1ml 0.1%膠原酶中37℃消化30min，每5min搖勻一次。
洗去膠原酶，吹打分散后，接種于預(yù)先涂有L-多聚賴氨酸的96孔培養(yǎng)板中，每孔含100μl無(wú)血清L15培養(yǎng)基，細(xì)胞約800個(gè)。
實(shí)驗(yàn)組分別加入純化的表達(dá)蛋白（分別以不同的蛋白濃度），陰性對(duì)照加入等體積表達(dá)蛋白的溶劑。
37℃ 5%CO2培養(yǎng)48hr后，每孔加入10μl MTT，37℃ 5%CO2孵育4hr。
加入100μl 20%的SDS處理液，37℃孵育20hr。
用EL×800微孔酶標(biāo)儀測(cè)定OD570值，數(shù)據(jù)分析。
