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脫鹽的簡單介紹

2023-4-3 閱讀(324)

寡核苷酸合成后,為了純化寡核苷酸成為天然的DNA結(jié)構(gòu),首先必須去除保護(hù)基團(tuán)。通過濃ammonium hydroxide處理,合成的寡核苷酸從固相載體上分離,2-氰乙氧基--磷酸二脂鍵的保護(hù)基團(tuán),以及堿基的保護(hù)基團(tuán)基(苯甲?;彤惗』┍蝗コ?,從而形成了天然的DNA結(jié)構(gòu)。然而,必要的去保護(hù)步驟完成后,寡核苷酸混合物還包含幾種必須被去除的小分子有機(jī)化合物。所有非必須有機(jī)化合物被移除的過程通常叫做脫鹽。脫鹽純化可以借助反向硅膠柱進(jìn)行。盡管脫鹽純化可以移除所有的非必須有機(jī)雜質(zhì),但它不能有效移除合成中產(chǎn)生微量的提前終止的寡核苷酸雜鏈。然而,脫鹽的寡核苷酸還是能夠滿足PCR檢測等基礎(chǔ)生物研究。




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