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配制Tris緩沖液的方法介紹

2022-2-23 閱讀(2265)

Tris緩沖液對于大多數(shù)生物系統(tǒng)都是不錯的選擇,因為它在25°C時的pKa約為8.1,使其成為pH值為7–9的有效緩沖劑。此pH范圍適用于大多數(shù)生物過程。與更專業(yè)的緩沖液(例如HEPES)相比,Tris粉還便宜且堅固。
有兩種制作Tris緩沖區(qū)解決方案的方法。

制備均處于所需濃度的Tris堿和Tris HCl溶液,然后將一種溶液(通常是Tris HCl)的等分試樣添加到另一種溶液(通常是Tris堿)中,同時監(jiān)控pH值直至獲得正確的pH值。實際上,很少這樣做。
二、制作大多數(shù)常用的Tris緩沖液的常用方法是僅從Tris基數(shù)開始。將適量的Tris粉末溶于水,用HCl調(diào)節(jié)pH值,然后將緩沖液補足至所需體積。假設(shè)在調(diào)節(jié)pH值時沒有過沖,則該方法不會改變離子強度。但是,在過沖并用NaOH或用Tris HCl重新調(diào)節(jié)并用NaOH調(diào)節(jié)pH后,離子強度會發(fā)生變化。根據(jù)Tris緩沖區(qū)的預(yù)期用途,這種更改可能重要也可能不重要。

 



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