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使用疏水色譜和親和色譜純化蛋白質(zhì)介紹

2020-12-29 閱讀(545)

疏水色譜:

疏水色譜基于蛋白質(zhì)表面的疏水區(qū)與介質(zhì)疏水配體間的相互作用,在高濃度鹽作用下,蛋白質(zhì)的疏水區(qū)表面上有序排列的水分子通過(guò)鹽離子的破壞被釋放,裸露的疏水區(qū)與疏水配體相互作用而被吸附。疏水色譜就是利用樣品中各組分在色譜填料上配基相互作用的差異,在洗脫時(shí)各組分移動(dòng)速度不同而達(dá)到分離的目的。隨著鹽離子濃度的降低,疏水作用降低,蛋白質(zhì)的水化層又形成,蛋白質(zhì)被解吸附。

親和色譜:

生物大分子有一個(gè)特性,某些分子或基因?qū)λ鼈冇刑禺愋院軓?qiáng)的吸附作用。如鎳柱中Ni可以與His標(biāo)簽的蛋白結(jié)合,這種只針對(duì)一種或一類(lèi)物質(zhì)的吸附就是親和色譜的原理。

 



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