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尿激酶的提取步驟及注意事項(xiàng)

2019-10-25 閱讀(6725)

尿激酶從健康人尿中分離的,或從人腎組織培養(yǎng)中獲得的一種酶蛋白。由分子量分別為33000 和54000 毫克蛋白兩部分組成。本品直接作用于內(nèi)源性纖維蛋白溶解系統(tǒng),能催化裂解纖溶酶原成纖溶酶,后者不僅能降解纖維蛋白凝塊,亦能降解血循環(huán)中的纖維蛋白原、凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅷ等,從而發(fā)揮溶栓作用。

提取方法:

1. 桶裝滿尿液后,存放在陰涼處。調(diào)尿液的PH直到6.5以下。夏季尿液易變質(zhì),為了防尉面增加0.8的苯酚。每次收集的尿液應(yīng) 在8小時(shí)內(nèi)處理完。

2.  沉淀處理:尿液保持在10℃以下,用氫氧化鈉調(diào)PH值到8.5,攬拌均勻,靜置l小時(shí),沉淀后用膠皮管虹吸抽出上層清液,酸化到PH 值5—5.5。

3.  硅藻土吸附。按酸化后尿液量l的比例,加入預(yù)先清洗處理成中性 的硅藻土,在5℃下吸附數(shù)小時(shí)。

 洗脫。先把硅藻土吸附物用5℃的涼水洗滌1次,然后裝入硅藻土柱(柱比1。1)中,用0.02%的氨水洗滌,使洗出液由渾變清,立即再用0.02的氨水和0.1m的氯化鈉溶液洗滌。當(dāng)硅藻土柱上淌出 的水由清交渾時(shí),即開始收集尿激酶。



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