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甲苯胺藍染色液染色方法

2018-11-16 閱讀(749)

甲苯胺藍是常用的人工合成染料的一種屬于醌亞胺染料類,是堿性染料,甲苯胺藍中的陽離子有染色作用,組織細胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色,可染細胞核使之呈藍色;肥大細胞胞質(zhì)內(nèi)含有肝素和組織胺等異色性物質(zhì)遇到甲苯胺藍可呈異染性紫紅色,可用于尖銳濕疣的初篩及肥大細胞的檢測。不推薦用于軟骨、胃粘膜等難染組織的染色。
肥大細胞的染色:
(1)組織脫蠟水。
(2)蒸餾水浸洗2-3次。
(3)甲苯胺藍染液染20-30min。
(4)稍水洗,洗去多余染色液。
(5)95%酒精分色,在鏡下控制分色效果。
(6) 用100%酒精脫水。
(7)二甲苯透明,中性樹膠封片。
肥大細胞染色結(jié)果:肥大細胞顆粒呈紅紫色,胞核呈藍色。
細胞涂片染色 :
(1)細胞涂片后,立即放入95%的乙醇中固定,取出放在紙巾上。 
(2)滴加1~2滴稀釋后的甲苯胺藍染色液進行滴染,加蓋玻片讓染料滲透到細胞中。
(3)后將玻片豎起,稍加壓力,使多余染料被紙巾吸去。
(4)無需干燥,直接鏡檢。
細胞涂片染色結(jié)果:細胞核、淋巴細胞呈深藍色;核仁呈紫紅色;紅細胞呈橘紅;細胞質(zhì)、單核細胞呈淡藍色。
原位雜交染色 :
(1)用蒸餾水或去離子水稀釋到相應(yīng)的濃度,憑經(jīng)驗一般稀釋比例大于1:10。
(2) 玻片在稀釋好的染色液中短暫浸泡。
(3) 在蒸餾水或去離子水浸泡數(shù)次。
(4) 按需求進行壓片固定。
神經(jīng)元細胞的染色:
(1)將載有細胞的玻片取出放入4%多聚甲醛中固定1h左右;
(2)到時間后取出用PBS沖洗1~2次即可;
(3)然后加入提前預(yù)熱的1%甲苯胺藍溶液,在50度左右的氣浴或水浴中染色20~30min;
(4)用梯度酒精已次脫水,分別為75%、90%、100%,也可自定梯度;
(5)在鏡下控制分色效果,這一步不太好掌握;
神經(jīng)元細胞染色結(jié)果:可見尼氏小體深藍色顆粒,細胞核呈淡藍色,背景基本無色。
        上海吉生化科技有限公司自產(chǎn)產(chǎn)品1%甲苯胺藍染色液,產(chǎn)品編號號為T82960,主要用于生化實驗中肥大細胞的檢測。



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