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1.elisa試劑盒實驗中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計算每個濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。
 
2.平均OD值減去空白孔的OD值。
 
 3.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條合適的方程。要想檢驗?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù),將對應(yīng)的OD值帶入該方程,計算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度高的那條曲線。 

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