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技術(shù)文章

解讀ELISA試劑盒中的抗體

閱讀:278          發(fā)布時(shí)間:2023-1-10

  在ELISA試劑盒中運(yùn)用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。

  多抗取白免疫動(dòng)物的抗血清,制備較簡(jiǎn)略,但抗血清成分凌亂,除含針對(duì)抗原(多個(gè)表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對(duì)要低于單抗,且制備周期長(zhǎng),批間差異較大。而單抗僅針對(duì)抗體的單一表位,ELISA試劑盒親和力和特異性均較多抗高,且制備技能老練,產(chǎn)量大,批間差異小,但結(jié)合位點(diǎn)的單一也正是其缺陷之地址,在雙抗體夾心法中,如包被和指示抗體運(yùn)用同一單抗,則由于結(jié)合位點(diǎn)的短少,簡(jiǎn)略構(gòu)成假陰性成果。在運(yùn)用雙單抗一步法時(shí),應(yīng)留意抗原過(guò)剩時(shí)的“鉤狀效應(yīng)"。

   在ELISA試劑盒中運(yùn)用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有3類,即天然抗原、人工組成抗原和基因重組抗原。天然抗原的純度不高,特異性不強(qiáng);組成抗原一般為多肽片段,短少天然抗原所具有的立體結(jié)構(gòu)表位,親和力不高,可能導(dǎo)致相應(yīng)表位的抗體漏檢;基因重組抗原具有安全、特異性強(qiáng)、親和力高、產(chǎn)量大等特征,是一種比較志向,但其純化比較困難。



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