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技術(shù)文章

探針法熒光定量PCR試劑盒的檢測及TaqMan探針方法

閱讀:695          發(fā)布時間:2020-2-13

                       探針法熒光定量PCR試劑盒的檢測及TaqMan探針方法

     紅燈高掛幸福搖,鞭炮齊鳴天地歡;日子美美心情好,闔家歡樂大團(tuán)圓;敬杯美酒送好友,遙寄祝福無限好;祝你鼠年交好運,心想事成萬事順!接下來介紹 探針法熒光定量PCR試劑盒的檢測及TaqMan探針方法

 

檢測方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時,報告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。

 

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